图示为70分子量的marker位置 膜上有但没有显影，目标蛋白分子量是75也没有显影，这个目标以前做过显影出来过。请问是为什么

检查一下一抗二抗是否正确，建议重新配制新的一抗二抗

可能你抗体坏了，如果以前显出过来的化。或者你的蛋白降解了

可能是你在转膜的时候把目的蛋白切丢了。有的时候由于各种原因，所要的目的蛋白并不一定在原来的分子量上显影，你如果按照应有的分子量切，就有可能把目的蛋白切丢。建议扩大面积转。