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        体外转录,转录酶结合在DNA双链的哪条链上,怎么判断是以那一条连作为模版?

        相关实验:体外转录合成单链 RNA 探针

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        dxy_z1kje177

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        3 个回答

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        RNA聚合酶上σ 亚基与启动子上特定区域的特异性结合,或者说启动子上特定的序列,就决定了哪一条是模板链。

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        bamboopiggy

        有帮助

        看你的实验目的,设计在设计转录模板时,必须确定需要的是正义链还是反义链转录本。若RNA是要用作与信使RNA杂交的探针(例如:Northern blot、原位杂交、核酸酶保护实验等),则需要互补的反义链转录本。反之,当进行表达、结构或功能研究时,或使用人工正义链RNA来构建RNA定量的标准曲线时,则需要正义链转录本。

        DNA模板上的RNA聚合酶启动子序列+1 G是转录产物中的第一个碱基。为了获得正义RNA,编码链的5’末端应当与启动子的+1 G相连,或正好处于下游。若要转录反义RNA,则是非编码链的5’末端应当与+1 G相连。若插入片段是在载体中,则应当在启动子和需转录插入序列的下游对载体进行线性化

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        未来9

        有帮助

        转录是由DNA合成RNA的过程,同样遵守5'->3'的合成规则,因而只需要启动子有方向就能确定出转录是发生在哪一条链。而启动子的方向是由序列所定义的,其并不是回文序列,是可以很容易地判断出方向的

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