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        菌液pcr检测重组质粒跑出来条带很弥散,是怎么回事,胶没问题

        相关实验:痘苗 DNA 检测实验

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        汤姆卜丽波

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        5 个回答

        user-title

        dxywode

        有帮助

        可能原因1.酶切时间有些长,因为定性试验,产物的量不甚准确,建议将酶的量做一个梯度,但不是将酶浓度稀释,这一点切记;2.镁离子浓度可能有些不适合,建议做一下调整。

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        可能是电压不稳定,电泳缓冲液不太干净,存在污染,退火时间过短,等等

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        菌落pcr 条带弥散没什么,因为菌落里很多杂七杂八的东西,只要你要的目的条带能出现就可以。或者也可能是你的buffer,或者是胶配的不匀,感觉你的marker也有点弥散

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        通常是非特异扩增过多引起,提高退火温度试试。PCR产物放置过久考虑产物降解;如果是PCR后及时上样,考虑引物特异性较差或者模板不纯(包括降解以及掺有别的DNA序列)。如果用PCR产物做模板的话,量太大也会有这个现象。

        user-title

        未来9

        有帮助

        重组质粒条带弥散的原因:

        1、PCR体系中存在污染
        2、电泳槽中电泳缓冲液不净
        3、电压不稳定
        4、如果PCR的模板是经过酒精提取的质粒等相关DNA,则酒精没有除净
        5、退火时间过长或过短,延伸时间过短等

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