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问
小鼠饲养过程中生长速度不一样,应该如何处理?
bamboopiggy
找个体差不多大的小鼠做实验,太大或太小的舍弃。否则一开始variation就太大了
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问
原代细胞培养如何避免细菌感染?
bamboopiggy
规范无菌操作,尤其是取材的动物一定要用酒精泡过,才能拿进超净台。用到的器械一定要高压灭菌
4 回答
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问
RT-pcr,跑出来是一条直线是什么原因?
迟C迟
一条线说明未起峰,未检测到目的基因。检查模板制备、引物、体系是否有问题。
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问
甘油法制备的感受态,是可以直接用热激转化还是可以电转?
迟C迟
感受态细胞制备方法不影响后续电转,可以用电激法转化。
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问
求救!大肠杆菌原生质体制备方法
迟C迟
1. 将适合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他营养丰富的培养基上,在37°C下过夜培养2. 高温灭菌大的离心瓶(250-500ml)以备第二天摇瓶用3. 准备几瓶灭菌水(总量约1.5升),保存于冷冻室中以备第二天重悬浮细胞用4. 转移0.2-1ml过夜培养物至装有500ml LB(或其他营养丰富的培养基)的1-2升挡板摇瓶中5. 37°C下剧烈振荡培养2-6小时6. 定时监控O.
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问
大佬看一下,细胞是否污染了霉菌
天一湖医者
从图片看是污染了,看着像酵母污染 。
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问
转染后出现黑色细沙颗粒
bamboopiggy
可能是你293细胞已经被支原体污染了,不转质粒的时候,变化不明显,你看不出来,建议换一株做。
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问
肝脏免疫荧光非特异性着色
balalaLy
绿色像是组织自体荧光,有没有做全阴性对照?就是一抗二抗都没加的。
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问
最近细胞一直污染,基本都是这种,请问这是什么污染,怎么处理
balalaLy
细胞污染属于概率问题,很难搞清楚是属于哪种污染,直接弃掉最省时省力
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问
求问这是真菌污染吗?
天一湖医者
看着是真菌污染,一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
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问
求助:这四个基因是怎么敲除什么意思?
bamboopiggy
在表达cd4的细胞和表达csf1r的细胞中敲除nr1h4 基因,不是四个基因
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问
裂红液会失效吗?会导致细胞死亡吗?
balalaLy
过期太久可能液体的ph改变了或者离子浓度改变导致其它细胞死亡
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2011 围观
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问
某个氨基酸缺失对蛋白功能影响可以用什么软件预测下致病性
迟C迟
可用NCBI的子程序预测蛋白结构,还有UniProt、SWISS、 STRING、ProtParam等数据库都可以试试。
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问
嘌呤霉素抑制蛋白合成实验
天一湖医者
嘌呤霉素的主要作用是抑制蛋白合成,这个不好验证。
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620 围观
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问
求教:HL-1细胞空泡
bamboopiggy
一开始的细胞空泡,可能是细胞老化的原因,传代过程中,这些细胞会死掉。后面小RNA干扰出现的空泡,可能跟你的转染试剂有关系。至于买细胞,你可以找那家公司在国内的代理帮忙买。
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问
0.5%的明胶封盘3天会不会由于封盘时间过长对细胞有影响?
bamboopiggy
你最好重新铺明胶,但是如果方便的话,用多聚赖氨酸比用明胶好。
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问
大家铁死亡抑制剂用多大的量呢?
天一湖医者
铁死亡抑制剂一般用量为5mg/kg
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问
怎么通过qpcr技术测定基因敲除鼠基因的表达
balalaLy
这题我真会,取鼠尾提DNA 跑pcr,引物及产物大小一般构建小鼠的公司会提供给你,pcr产物跑胶,wt只有一条条带,纯合子只有一条比wt小的目标条带,杂合子有两条条带,上面的那条跟wt同大小,下面那条跟homo同大小
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问
可以在两个融合蛋白间的linker边上再加酶切位点吗?
天一湖医者
这个看情况,如果linker不是很长,可以在引物合成的时候直接合成进去。
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问
我想问下有人做过RNA核质分离实验吗?
Eason老歌迷
我们也遇到过类似情况。我们觉得可能是由于实验中操作或者其他原因导致核泄漏了,细胞核内的物质到了胞质中。
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