我想问下有人做过RNA核质分离实验吗？
求知的小小鸟
我将U6作为核内内参，GAPDH作为胞质内参，但是但是pcr结果显示U6百分之八十在质中表达，这趋势跟预期完全相反了，但是GAPDH又正常哦？怎么回事？有什么解决方案吗？我逆转录的时候用的是等质量的RNA，不是等体积
3 个回答
mxy5120
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两个基因做内参都没有固定的标准。05年前，做miR用的是gapdh,后来只是发现用U6或是5S效果更好而已。你直接给出原始的gapdh的Ct，表明Gapdh合适作为内参基因就行了。
Eason老歌迷
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我们也遇到过类似情况。我们觉得可能是由于实验中操作或者其他原因导致核泄漏了，细胞核内的物质到了胞质中。
bamboopiggy
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说白了，就是你想找个核内的内参，U6一般是可以，要不是你试试histone H3。
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