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        我想问下有人做过RNA核质分离实验吗?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        求知的小小鸟

        我将U6作为核内内参,GAPDH作为胞质内参,但是但是pcr结果显示U6百分之八十在质中表达,这趋势跟预期完全相反了,但是GAPDH又正常哦?怎么回事?有什么解决方案吗?我逆转录的时候用的是等质量的RNA,不是等体积

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        3 个回答

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        mxy5120

        有帮助

        两个基因做内参都没有固定的标准。05年前,做miR用的是gapdh,后来只是发现用U6或是5S效果更好而已。你直接给出原始的gapdh的Ct,表明Gapdh合适作为内参基因就行了。

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        Eason老歌迷

        有帮助

        我们也遇到过类似情况。我们觉得可能是由于实验中操作或者其他原因导致核泄漏了,细胞核内的物质到了胞质中。

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        bamboopiggy

        有帮助

        说白了,就是你想找个核内的内参,U6一般是可以,要不是你试试histone H3。

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