实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问核酸空白体系出现翘尾该怎么处理？

bamboopiggy

看是不是这个孔有问题，或者是你污染了？

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问K599发根农杆菌注射大豆子叶，为什么只长愈伤不长根

dxy_g9y5gije

首先考虑植物激素使用问题，植物组织培养过程中，植物激素的使用顺序及比例都会影响结果，植物组织培养过程中，若只分裂而不分化出芽和根，其可能原因是细胞分裂素和生长素配比不对，你查查文献，看看人家都激素使用

3 回答695 围观

问救救，WB苦手又来了，几乎所有条带都这样，没有蛋白，背景脏~

天一湖医者

背景脏不一定是因为仪器不干净造成的，也有可能是蛋白降解或者整个实验过程中条件不合适造成的。

3 回答479 围观

问多重PCR可以分开做吗？十六对引物就做十六孔，都是同一次逆转的cDNA，然后一起扩增

balalaLy

如果是要样品或者组别之间进行比较最好一起做或者至少每次做都有可以相互比较的组别。

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问想用流式测小鼠结肠巨噬细胞线粒体ROS含量，在细胞处理的时候需要加破膜液吗？

bamboopiggy

仔细看你用的ros的kit的说明书，说明书会提到的

4 回答205 围观

问qPCR部分扩增条带不显示cp值？

汤姆卜丽波

可能是加样问题或者八联管出了问题

5 回答306 围观

问MCAO模型，8周年龄的成年小鼠（C57）线栓插多深，从颈内外动脉分叉处算的话？

bamboopiggy

大概1cm，但是主要注意手的感觉，轻缓推进，直至感觉到阻力为止。

3 回答800 围观

问求助！求助！

汤姆卜丽波

哪个？指示剂下面的那条么，都有的没关系

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问kcl切胶回收蛋白

balalaLy

很有可能是你的buffer出现问题

5 回答699 围观

问流式和wb结果有差异

汤姆卜丽波

首先流式和wb抗体不一样，不能混用，还有就是你要明确你的蛋白表达量怎么样，流式不适合检测低表达的蛋白，低表达的还是采用western（尤其是化学发光底物更佳）和免疫组化更好。当然，流式最大的一个特点就是，可以定量（百分比），如果是高表达的用流式细胞仪非常有优势。

4 回答989 围观

问WB跑胶时同时显示V和mA

汤姆卜丽波

一般是看左边的指示灯，你这个是74mA跑过来的

4 回答374 围观

问提组织RNA

bamboopiggy

你的od值，是260/230吗？如果不是，建议看一下260/230，这个值在1.8左右才好，感觉就是你测的rna的浓度虚高，导致内参CT值偏高。

3 回答750 围观

问新冠核酸检测

天一湖医者

一是严格检测资质准入。二是严格检测质量控制。三是不断优化技术规范。四是重点加强第三方检测机构监管。

5 回答431 围观

问染料法绝对定量，为什么扩增曲线和熔解曲线都有，但是测不出Cq值

汤姆卜丽波

这个扩增曲线就有问题，8-9个循环就到平台期了，曲线也不光滑，看看是不是模板浓度的问题，还有你的酶用对没

4 回答397 围观

问各位有见过 lnc与蛋白同名的吗

汤姆卜丽波

一般不会同名，这种情况可能就是公司说的那个原因

3 回答394 围观

问3T3-L1诱导时细胞的空隙很大，越诱导越大是什么情况呀

汤姆卜丽波

是不是加诱导剂的问题，细胞状态是对的，3T3L1加诱导剂后比较脆弱，一定要轻轻加，用移液器

4 回答267 围观

问跪求！C2C12分化的马血清大家用的都是什么呢

bamboopiggy

买不到，就找人借吧，西格玛的我们也用过，是可以的。反正要买进口的，国内的实在无法判断能不能用。

2 回答553 围观

问4kb载体与3kb片段连接一直不长菌落

bamboopiggy

你热激后加的是空白的lb吗？不是带抗性的吧？如果你师姐能做成来，至少证明片段什么的没问题，那就考虑是什么液体加错了。

3 回答932 围观

问wb条带出不全，35kD以下蛋白都是空白，求指导

渐雨渐雨

有试过把胶倒过来转膜，但是仍然大分子的能转过去，小分子的消失。转膜用的是0.45的PVDF膜。分离胶和浓缩胶的比例也测试过，试过1：1和3：7的，但仍然是这个样子。分离胶有试过10%、12%、15%的，小分子仍然出不来。

6 回答346 围观

问四联抗生素C57伪无菌小鼠构建

bamboopiggy

看参考文献，有人用的是灌胃的方法，你如果要小鼠喝的话，建议每天换液，因为抗生素也有个降解的时间啊。

4 回答3986 围观

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