重组蛋白用于体外细胞培养时内毒素标准相关问题
丁香实验
最近在做蛋白纯化，因为纯化的蛋白要用于体外细胞培养，想问问各位蛋白中内毒素对细胞培养有没有影响？
内毒素要小于多少才能用于细胞培养和免疫小鼠，因为之前都没做过这方面的，再加上也没找到关于实验动物中内毒素含量标准，希望大家能帮忙回答一下。
17 个回答
dxy_4ix81at3
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- 内毒素含量在5eu/ml比较好。
JCorona
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1.内毒素对细胞是有影响的，尤其是免疫相关的细胞，例如RAW264.7；2.一般推荐内毒素的浓度低于5EU/mL
verbalkint
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有影响，会引发动物的免疫反应，对细胞可能影响小一些但也是不好的。内毒素可以通过很多方法去除，比如分子筛，加detergent等等方法
隔壁家的小夜猫子
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内毒素有专门的柱子可以去掉的，你可以用给质粒去内毒素的试剂盒试一下。
ZZDX-YILILI
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如果用于细胞和动物实验的话，最好越小越好，用商业化的鲎试剂盒去除蛋白质内毒素一般就能达到 0.001Eu/ml 以下，所以采用标准化去内毒素试剂去就应该是没有问题的。
内科小护士
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应该会有影响的，血清中内毒素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代；反之，内毒素含量过高，会直接导致细胞状态不良。通常国际上要求血清中内毒素含量≤10EU/ml，此时血清被定为特级。
dxy_h7vcp8v3
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内毒素对细胞培养是有影响的，因为它是毒素，可能对细胞产生毒害作用，建议低转速低温慢慢表达培养。其次，内毒素的浓度设置，建议可以设计浓度梯度，高 中 低三个浓度摸一下实验条件，在进行实验。
dxy_d4xj2yg7
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小鼠免疫是制备抗体吗？我们做抗体的话，免疫小鼠都不限制内毒素的，影响不大。细胞实验一般＜1EU/mg就可以，如果要求比较严格，可以控到0.5以下
dxy_pni5ki46
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动物实验应该是没有内毒素标准，如果参考人的话是最大可接受注射剂量是5EU/kg/h，换算到小鼠身上就是0.05EU/10g体重，不过我觉得对于免疫动物应该影响不大，细胞培养的话内毒素会有影响，可以试试用内毒素去除树脂去除
dxy_4uyyu09r
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内毒素的确养细胞会有影响，建议去除后再进行细胞培养。
z流沙z
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内毒素里面主要是LPS，对细胞肯定是有影响的，有没有试剂盒提纯的时候，就是可以去除内毒素的？
Guoood
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首先蛋白纯化过程中所用到的培养基，液体试剂均用注射用水配制，保证过程无菌。内毒素含量的话也没有明确的一个限制，但要尽可能的低，最好是能低于0.01EU/ug 。
飞天幻雪
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这个没有具体要求。看你目的细胞的抗感染能力了，如果做细胞，最好在细胞里面重组蛋白，尽量不要用大肠杆菌来获取
bamboopiggy
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你采用标签蛋白进行纯化的话，一般内毒素量不会大，对细胞影响不大，也可以用来免疫动物。
一支肾上腺素
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内毒素对每种细胞的影响是不一样。在准备血清和其他试剂时，选择极低的内毒素（最好≤1EU/ml），对实验至关重要，至于具体小于多少，我没做过也没查到文献资料。
vae1476
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内毒素会严重影响细胞生长的，避免内毒素影响需要注意，1是规范实验过程，例如全程使用灭菌注射用水，2是已经引入的通过超滤法等去除
dxy_bq4uxnd
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蛋白质中的内毒素对细胞和动物的影响不是很大，不必太担心，如果担心的话可以使用去内毒素试剂或是柱子去除。
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