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请问WB条带出现中间部分空白是什么原因?是转膜导致的吗?

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雨素樱

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5 个回答

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balalaLy

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如果是圆的那种空白就是转膜的时候有气泡。

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bamboopiggy

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你说的是烧心吧?就是一团条带的中心是白的,这个是因为你蛋白浓度太高了,与辣根过氧化物酶反应的太厉害了,把底物都烧光了,反而发白

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dxy_gwrp7ndq

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要解决条带中出现整条白色空斑,需要减少蛋白上样量、稀释一抗和二抗的浓度。如果条带中出现白圈的话,是转膜时候,膜与胶之间有气泡,需要在制作“三明治”时,注意赶走气泡。通常将电转液倒入一个盘子里,液体高度与第一层滤纸齐平,然后往滤纸上浇一些转膜液,把电泳胶用清水清洗后平铺在滤纸上,随后在确认滤纸与胶之间无气泡后,再往胶上浇一些电转液,之后用双手的拇指和食指轻轻夹住PVDF膜两侧中间,使膜成U型,再将U型底部接触到胶的中间,慢慢往两边放下膜,这样可以减少气泡。上层滤纸同样用U型的放置方法,可以用玻璃棒贴实一下,然后盖上海绵垫。

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秋秋欣欣

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应该是转膜的时候膜与胶之间有小气泡

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Eason老歌迷

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你好,有图吗?如果条带中出现白圈的话,是转膜时候,膜与胶之间有气泡,需要在制作“三明治”时,注意赶走气泡。也可能是过高的蛋白上样量或一抗和二抗浓度过高都会促使底物过快的消耗,导致我们在做化学发光检测时,发光底物已经消耗殆尽而形成空斑。

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