在跑wb的时候，条带都连到一起变成一条线是怎么回事？

孔太密了，上样量太大了，导致感觉连到一起了

1.检查用的胶的浓度和靶标蛋白的分子量是否适合

2.上样量过高，有的人怕蛋白太少，蛋白浓度又低，蛋白加的太多，一般上样量20-25ug即可

3.样品离子浓度高

4.拔完梳子后，加样孔有残留的胶，这样上样量就少了，因此建议，拔梳子后一定要用水把残留的胶冲净，但也要注意，水一定要吸干，否则和残留胶一样会导致同样的结果。

5.拔梳子时不要左右摇动，避免破坏加样孔底部。

6.上样要迅速，否则会引起样品扩散。

7.上样与跑电泳之间的间隔太长,尽量缩短时间间隔。

8.装配三明治结构要迅速。

9.电泳的电压太高，发热导致扩散。

10.降低一抗浓度。

11.可以适当缩短曝光时间。

12.10%APS现配现用,APS长期存放也会引起同样的问题。

1）上样量过大 这里指的是质量数过大，一般上样在20-100ug之间就可以，可以减半上样量，试试看

2）一抗孵育时间过长，适当缩短孵育时间，也可以改善。

可能是你的上样过程出现问题了，一个你的上样量太大了，或者是你上样后出现飘样。

原因很多，有可能是上样量太多了，或者你在配胶时不小心把胶弄破了，或者样品扩散了

可能是样品中的含盐量太高，开始之前可先用小电压把盐跑掉