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转投期刊咨询
府宅
期刊审稿偏慢,要4-8周,录取较难
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问
内参不齐这是什么原因?样品浓度是5
bamboopiggy
1 可能这个管家基因不适合在你的实验中做内参,换个内参,2,bca法测蛋白浓度还是有差异的,你可以根据这个内参,然后读个灰度值,再重新调一下内参
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问
外泌体提取?提外泌体怎样才算的好?想请教大家一下。
府宅
WB检测可以发现样品中具有外泌体的标志物,可以一定程度上排除溶酶体、蛋白聚团、支原体等情。NTA粒径分析可以反应外泌体样品中粒子的群体特征,了解其纯度
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问
求教,大片段目的基因(6700bp)如何获取?
府宅
可以根据数据库选择表达量高的部位进行模板制备,这样的话,也比较容易扩增出来;可以分成两三段就可以了,选择合适的酶切位点;再次,选择高保真的聚合酶,这样扩增出来不容易出现突变,可以适当提高循环数,增大产量,可以设置梯度PCR,寻找最优的条件。
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问
求助,WB背景黑,条带淡怎么解决
Eason老歌迷
现在都夏天了,你减少二抗孵育时间看看。我之前也遇到过这种情况。
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问
使用鸡毒支原体作为病原菌,细胞细菌污染。
bamboopiggy
你用支原体清除剂,或者是:阿奇霉素、强力霉素,或有时左氧氟沙星或莫西沙星,试试,青链霉素对没有细胞壁的细菌没有作用的
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问
求做western和IP裂解蛋白的注意事项(小分子蛋白10kd左右),因为一直IP不下来,input有时候也无条带……
Eason老歌迷
裂解蛋白,一定要在冰上进行,因为有的蛋白很容易降解,尤其是现在天气热,你搁常温一会就降解了
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问
怎么计算荧光共定位效率???
天一湖医者
在ImageJ菜单下Analyze,Plot Profile(快捷键Ctrl+K)可以找到Plot Profile工具。Plot Profile只适用于线(Line)和矩形(Rectangluar)选框,表示线段和矩形选框所经过的范围内的灰度变化: 对于仅含有红绿蓝三通道RGB格式荧光图片,可在ImageJ菜单下Image,Color,Split Channels,得到Red,Green,Blue
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问
细胞来源,如何才能确定?各位前辈:本人预涉及胃癌细胞实验,手里有几株细胞,可不知细胞具体 来源,不知如何查询?
bamboopiggy
MKN45 established from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach (medullary type) of a 62-year-old woman MKN-1 (mutant P53):Gastric adenosquamous carcinoma ,Derived from metastatic site:
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问
寻找多个序列的直系同源序列,如何精准查确?
Eason老歌迷
同源序列的查找,顾名思义就是我们要找的是和这个序列相似的序列,比如拟南芥,我们找到这个植物的一个序列,那就是把一个数据库当作比对的参照物,把这个一个拟南芥的序列与这个数据库进行比较,查看那些物种的序列和这个序列相似,这个是线上的方法,我们直接利用ncbi中的官网的方法比较blast。
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问
关于TGF-BETA/SMAD通路的相关问题?
府宅
可使用加减三甲散及其虫药可使SMAD表达降低
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问
STR引物设计如何开始呢?
天一湖医者
引物以18~30bp为宜;引物中C+G含量宜在50%左右;引物内部和引物之间不应含有互补序列;引物的碱基顺序与非扩增区域的同源性应小于70%;引物的3’末端与模板DNA一定要配对,但末端没有严格的限制,故引物设计时可在5’末端加上限制性内切酶位点和/或启动密码ATG等;引物合成后必须纯化以去除合成产物中的不完整序列、脱嘌呤产物、碱基修饰链等“杂质”;引物的终浓度一般为0.2~0.5μmol/L,过
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问
蛋白分子量62-21kd,忽然发现一直用的PVDF膜是0.22μm的,对结果有影响吗?
秋秋欣欣
出现哑铃状的结果图最可能是你胶的问题,0.22的膜转62的蛋白完全没有问题
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问
目的基因ct和外参ct
天一湖医者
可以用,不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象。
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问
重组腺病毒抗原表达鉴定
秋秋欣欣
是不是病毒量不够,没有转染成功啊
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问
请问各位大佬知道为什么我的PMB单独加到培养液里RAW细胞没有反应,但是跟我的一个蛋白混合后加就会引起细胞的炎性反应吗?
天一湖医者
有可能是血清浓度问题,或者是培养液有问题。,
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问
真菌培养过程中所用培养基调整ph值后不易凝固
生如夏花zzh
酸度过高也可能导致培养基溶解。再试试看
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问
想知道同源重组对于链霉菌有什么特殊需要注意的吗
府宅
用硫链丝菌素抗性基因作为筛选标记,可以简单直接地获得可能发生同源重组的菌株,以便进一步从分子水平上用杂交进行验证
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问
我做流式的时候,总是有非特异性染色,该如何避免
生如夏花zzh
排出一下是否有大量死细胞。重复性实验。
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问
求助PCR条带问题?
dxy_2cic6tye
用的多大浓度的胶?目的片段大的话,胶浓度应该低。另对照样本跑的怎么样?marker图谱是否正常
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