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问
求助,WB没有条带怎么解决
bamboopiggy
如果没条带,最好是重新配抗体,别用回收的,有的抗体回收最多用3次就不行了。
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问
膜蛋白按照说明书1:50一抗浓度,整个细胞(悬浮细胞)都染色。调整1:500后还是整个细胞都有染色图2,请问为啥说明书只有膜上有
bamboopiggy
1.继续调整浓度,2,用促贴壁试剂让细胞贴壁,然后再染
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问
荧光定量pcr检测,每个样品需要做几次,为什么?
天一湖医者
最多一个样品一次,反应用两个重复,以防有明显的操作失误。如果两个孔的数据很接近,就取平均值作为一个值来看待。如果2者差别很大,说明有操作失误,这个样本的结果就不能要,需要重做。
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问
请问怎样检测小鼠结肠组织的凋亡率呀
bamboopiggy
用凋亡的marker,去染小鼠结肠组织。
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问
WB预制胶和普通胶的差别是什么呢?除了配制的差异
bamboopiggy
其实预制胶如果不是梯度胶,和你自己配的没有什么区别,只是省了你的事,多花点钱而已。
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问
能否从外周血单核细胞中提到 CD34+ 细胞 ?
bamboopiggy
cd34分子是高度糖基化的I型跨膜糖蛋白,选择性地表达于人类及其他哺乳动物造血干/祖细胞表面,并随细胞的成熟逐渐减弱至消失。已有愈来愈多的研究结果表明cd34分子在介导细胞间黏附作用中发挥着重要作用,可以参与造血干细胞的运输、定植,参与炎症反应以及淋巴细胞的归巢。所以要想在外周血中提到cd34+的细胞,还是需要刺激的
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问
系统进化树问题,如何确定相关序列?
dxy_gwrp7ndq
NCBI 、DNAMAN 、DNAStar 、Bio edit 均可构建进化树
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问
酶的溶解需要在冰上进行吗?
bamboopiggy
需要在冰上,或者您在4度的coolroom里溶解也可以。反正不能温度高了
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问
求助 | 为什么总有杂带呢,连内参都有
bamboopiggy
可以用,趋势在就可以用,这个杂带是抗体问题。
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问
hif-2α减少降解求助
Eason老歌迷
提蛋白的时候,全程放在冰上操作。我之前也是降解很严重,放冰上,就效果还不错
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问
求判断一下是什么菌
bamboopiggy
真菌污染培养液清亮透明,不会像细菌感染大爆发,所以很难早期发现,镜下有时候象丝状,有时候象珊瑚状,慢慢地会长出很细的黑色丝状物,这个时候,已经晚了,细胞很难救活了
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问
拥挤棒状杆菌感染抗生素如何选择?
dxy_gwrp7ndq
应根据药敏实验选择相应抗生素控制感染
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问
植物CP蛋白的单抗感觉特异性不是很强,能跑出来很多带,请问这是正常现象吗,如何解决?
dxy_gwrp7ndq
如果实在没有更好的抗体,建议采用阴性对照和阳性对照来确定上述哪个条带是目的条带。
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问
各位老师,请问动物实验生化指标中的SOD和MDA的数据是不应该反着来,会不会有这两个指标同时升高或同时降低的情况
dxy_gwrp7ndq
SOD 和MDA,一个是清除超氧自由基的酶,一个是指膜过氧化程度。保护指标和损伤指标不会同高或同低
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问
抽提完的质粒,有什么办法去内毒素吗?
天一湖医者
使用过滤中性的细菌裂解液,并加入专门的不含内毒素缓冲液(缓冲液ER)在冰上进行共同孵育。不含内毒素缓冲液能够避免LPS分子与树脂结合,从而使每微克质粒DNA中含有的内毒素少于0.1EU。
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问
外泌体载药
Omiget12
目前都在研究这块,具体结果还不确定,不过这个前提需要保证外泌体比较纯,浓度比较高。
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问
怎么用qpcr来检测病毒的滴度呢,样品是293t细胞产生的病毒,需要怎么处理吗?
汤姆卜丽波
通过在载体的长末端重复序列区(LTR)设计定量引物,利用荧光实时定量PCR测定重组慢病毒中LTR拷贝数来测定病毒颗粒数和有效感染的病毒颗粒,通过慢病毒颗粒数与实际有活力病毒滴度的比较,可以计算得到重组慢病毒感染效率.
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问
关于瞬转,目前质粒已经构建好,但是使用转染试剂性价比不高,请问有推荐的吗?
Omiget12
建议可以用慢病毒包装,我们经常做还是可以的。转染向Lipo这些价格太高了,没有必要,可以用些性价比比较高的就行。可以查一下Omifection这款产品。
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问
外泌体纯化超速离心,亲和纯化,微流控,粒径排阻色谱
Omiget12
本人用过一款试剂盒,方法简单,提的外泌体也比较纯
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问
ELISA可以检测外泌体吗?不用来源的样本前期处理对实验结果有很大影响吗?
Omiget12
基本很少用这种方法检测外泌体。大多用的是WB检测外泌体蛋白,NTA检测外泌体颗粒数和大小,电镜观看外泌体形态。这三种是最常用的
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