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        求做western和IP裂解蛋白的注意事项(小分子蛋白10kd左右),因为一直IP不下来,input有时候也无条带……

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        dxy_6mhspn82

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        7 个回答

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        Eason老歌迷

        有帮助

        裂解蛋白,一定要在冰上进行,因为有的蛋白很容易降解,尤其是现在天气热,你搁常温一会就降解了

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        bamboopiggy

        有帮助

        1.wb和IP的lysis buffer不一样,wb的要裂解的强一些,IP的要弱一些。 2.转膜用0.22um的膜

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        input也没有,会不会是核蛋白没有裂解出来?

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        用超声充分裂解,延长裂解时间。

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        Guoood

        有帮助

        小分子蛋白WB可以用4-20%梯度胶试试,转膜用0.22umPVDF膜

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        尽量选择0.2μm的膜,缩短转移时间;可以选择PSQ膜,同时缩短转移时间。也可以将两张膜叠在一起,再电转。

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        府宅

        有帮助

        可选择孔径0.22um的PVDF膜或者NC膜,转膜时间缩短,另外可采用Tricine-SDS-PAGE体系

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