求教，大片段目的基因（6700bp）如何获取？

可以根据数据库选择表达量高的部位进行模板制备，这样的话，也比较容易扩增出来；

可以分成两三段就可以了，选择合适的酶切位点；

再次，选择高保真的聚合酶，这样扩增出来不容易出现突变，可以适当提高循环数，增大产量，可以设置梯度PCR，寻找最优的条件。

可以分段扩增。比如分成5－10个PCR，每段扩600－800bp，设计一些overlap的区域。最好这些区域中含有唯一的酶切位点，然后通过连接酶把基因连起来

可以用限制性内切酶来获取，如果是已经知道序列的基因的话