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        我做流式的时候,总是有非特异性染色,该如何避免

        相关实验:药物对动物腹腔巨噬细胞的影响实验

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        Eason老歌迷

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        3 个回答

        user-title

        生如夏花zzh

        有帮助

        排出一下是否有大量死细胞。重复性实验。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        降低一下你的抗体浓度试试,或者做好阴性对照,gating出去那些非特异染色

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        非特异性染色一般来源有以下几点:

        1.抗体的特异性不好,结合了其他抗原

        2.抗体结合了特异性的Fc端受体,而不是通过Fab端结合

        3.抗体通过蛋白质直接的粘附作用结合在细胞上

        4.死细胞细胞膜破损后抗体被聚集在死细胞内部

        5.细胞内大分子产生的自发荧光

        建议采用以下措施来减少非特异染色:

        1.每个抗体使用前都需要做最佳工作浓度的测定

        2.使用Fc端封闭,BSA封闭

        3.做死细胞染色,分析时排除死细胞

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