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问
请教一下各位质粒小提的注意事项
balalaLy
最终洗脱的时候可以把洗脱液加热到50度左右,可以明显提高质粒洗脱效率
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问
请问各位大佬,做靶向代谢组学测短链脂肪酸,一组小鼠需要设置几个重复样本
Eason老歌迷
如果样品制备不是非常难,经费不是非常有限,我建议还是设置3个生物学重复吧。如果使用T检验,你应该设置尽可能多的生物学重复,建议至少3个重复。
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问
流式细胞数计骨髓造血干细胞数?
天一湖医者
一般的细胞-80保存2-3个月,但最好不要超过2个月。
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问
裸鼠身上起了一层白色的皮,是什么原因
天一湖医者
一是动物质量的问题,二是有感染某种菌,三可能是药物的作用。
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问
4T1细胞出现凋亡残留的碎片,细胞变小,什么原因
天一湖医者
细胞状态好的时候生长特别旺盛,代谢很快,所以养这个细胞需要勤快,基本上每天都需要操作,一般是一天换液,第二天传代,在50%以上就可以传代了,1传3-4都可以,稍微长的太满达到80%以上,接下来传代后的状态就有影响。这个细胞很容易出现培养瓶边缘角落消化不完全出现累计的现象,这一部分出现凋亡会影响到整个培养瓶的细胞状态。
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问
犊牛小肠上皮细胞提取后不贴壁,但是感觉培养瓶中细胞增多,怎么办
天一湖医者
细胞不贴壁的一些原因 1. 胰酶消化时间把控不当:消化不够细胞本身就是成团的;若胰酶处理太久,容易造成细胞膜蛋白损伤,使细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。 2. 缺少贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降很多。 3. 支原体或细菌的污染。 4. 培养液配制、储存不当,如pH值过碱,Gln量太少等原因。
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问
犊牛小肠上皮细胞提取不贴壁的问题
天一湖医者
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问
模拟肿瘤微环境的刺激物
天一湖医者
可以,模拟肿瘤微环境可以用LPS来刺激。
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问
镍离子柱填料保存问题
天一湖医者
镍柱填料在4℃冰箱里用20%乙醇可以长期保存。
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问
akk培养问题。。。。求助求助求助
天一湖医者
液体培养基变浑浊的原因有以下几点:细胞受到损伤,细胞内容物外露造成的。培养基可能污染了,取部分培养基进行检菌试验
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问
CTll-2细胞培养
天一湖医者
1.CTLL-2细胞的培养:培养CTLL-2细胞的培养液是含有10%小牛血清和纯化IL-2(15~20IU/ml)或大鼠条件培养液(20%)的RPMI-1640培养液。一般在细胞培养瓶中接种2×104细胞/ml,在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3天,细胞密度到达约2×105/ml时再稀释到2×104/ml,加入新鲜的IL-2或大鼠条件培养液继续培养。 2.大鼠条件培养液的制备
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问
在跑完定量PCR后,如何处理相对定量数据?
Eason老歌迷
qPCR的数据相对定量分析其实很简单。分享一下自己的经验,最常用,最普遍的相对定量方法就是2^-△△Ct法,该法最最简单的说就是:首先将一次实验的所有基因Ct值整理好,之后用每一组样本自身的目的基因Ct值减去自身内参基因Ct值,得到的数就是△Ct;换成公式就是:△Ct=Ct(目的基因)-Ct(内参基因);然后,将每一组样本每一个目的基因的△Ct都算好,整理进Excel,用本次实验中待研究样本的△C
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问
为什么同样的复孔,会有不同的平台期,即平台期分散?
Eason老歌迷
可能是,你pcr纯化不够,出现了不同产物。
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问
淋巴细胞分离液为什么可以区分PBMC和血细胞?
Eason老歌迷
因为淋巴分离液密度在红细胞和单个核细胞之间啊,他们一离心,不就分三层,那不就可以区分了吗!
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问
细胞污染还是细胞碎片
橙子皮苹果
应该是你传的时候没有吹打开,细胞成团了
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问
求助:同一种细胞在不同的细胞培养板上进行培养,饥饿时间一样吗?
秋秋欣欣
其他条件都是一样的话,密度一样的话,饥饿时间应该差不多的
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问
人群PCR
Eason老歌迷
先均一化数据,去除误差,然后在计算
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问
跪求:鼠原代血管平滑肌细胞VSMC经验?
天一湖医者
鼠原代血管平滑肌细胞1)取材:颈椎脱臼处死小鼠,在75%乙醇中浸泡2min,用眼科剪镊依次打开胸、腹腔,暴露心脏;10mL注射器抽取无菌PBS约10mL,连接在1mL注射器针头上穿刺左心室,冲洗主动脉。完整分离主动脉,放入35mm平皿中,加入2mL PBS缓冲液。在体视显微镜下小心将血管周围的结缔组织去除,使用显微弹簧剪沿主动脉纵轴剪开动脉,用显微镊子小心分离动脉中膜层并移入另一个含有2mL含20
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问
请问大家肽类物质可以做网络药理学吗
Eason老歌迷
可以啊,我刚查了一下,不少这方面的文献。
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问
硝化细菌 噬菌体
天一湖医者
噬菌体具有体积微小,结构简单和严格的寄生性,必须在活的宿主细胞(如细菌)内繁殖,对寄生的宿主细胞表现出高度特异性,通常能将宿主细胞裂解,为一类属于病毒的微小生物,称之为噬菌体。 其实际意义是可根据噬菌体寄生宿主菌细胞的高度特异性,并使其裂解这一特点用于细菌鉴定,亦可用于流行病学调查时的细菌分型。
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