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ChIP-nexus和ChIP-exo和普通的ChIP有什么不一样?
bamboopiggy
CHIP-nexus 是能够在基因组中精确定位转录因子结合位点的新技术,该技术分辨率很高。CHIP-exo(ChIP外切酶),应用于各种蛋白因子结合在基因组上结合位置的鉴定,以达到碱基对水平的分辨率。c
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问
如何选择合适的elispot试剂盒,要做疫苗抗体效价检测
天一湖医者
1、查找待测样本的蛋白浓度 可以通过NCBI的文献,给出的蛋白表达量参考值来比较elisa试剂盒给出的样本值与报道值是否一致。2、试剂盒的应用种属、检测样本的种类 除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用。3、•.检测范围: •建立线性范围:需测定9-11个浓度水平,每个浓度水平重复测定3-4
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问
血液流变学检测怎么保证准确性?
Eason老歌迷
为保证检测的准确性,应特别注意采血时间及摄食时间。在采血方式上,也应注意避免造成血粘度误差的因素,如采血时压脉带的压力大小、血管受压时间长短等均对血粘度检测结果有所影响,血管在较高的压力下受阻时间长,则血液会有所浓缩。抗凝剂的正确使用也是保证检测准确性的关键之一。因草酸盐或枸橼酸钠等抗凝剂可引起细胞的形态改变、影响红细胞的聚集性和变性能力,导致血粘度检测不准确。
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问
培养瓶是用密封盖好,还是用透气盖好?
Eason老歌迷
各有好处,其实都差不多。密封盖是一次成形不带内垫,常用于密闭培养,可保证其密闭性。透气盖的话,瓶盖带有0.2μm疏水滤膜,提供无菌气体交换,减少污染的风险.常用于开放培养,推荐用于CO2培养箱培养,尤其适用于需要长期培养的实验。
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问
细胞培养过程中出现碎片如何处理?
Eason老歌迷
我比较常用的几种方法 一个是稀释法。细胞稀释后还能增殖,会越来越多,而细胞碎片相应地会越来越少。还有就是自然沉降法。将细胞悬液移到离心管中,等细胞大部分下沉时,可将上液吸弃,再加入培养液悬浮细胞,此方法可反复使用,同时每次可显微镜下观察是否符合你的要求。
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问
复苏后应不应该立马去除掉DMSO?
Eason老歌迷
肯定的啊。细胞复苏后是需要立即离心去DMSO,这样可减少DMSO对细胞的损害,DMSO在常温下对细胞的毒性作用较大。
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问
为什么将质粒转化到感受态细胞中,培养基培养后再提取质粒?
balalaLy
质粒转导进感受态后可以随着感受态细胞的增殖质粒得到复制扩增
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问
蛋白质SDS-PAGE实验的问题?
Eason老歌迷
目的蛋白条带太弱,有几个原因。可能是你的蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不多。可能是你转膜没转好,没转完全,用丽春红染一下看看。可能是你的抗体稀释浓度太低了,或者是孵育时间太短。也可能是你的显影问题,增加一下显影时间。
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问
RT-PCR的相关问题?
bamboopiggy
只合成第一链就可以做RT-PCR,随着扩增过程,会形成第二链的。
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问
Qpcr扩增内参和指标的CT值相差太多怎么办?内参Ct是13,指标Ct是30
Eason老歌迷
相差太大的话,你重新p一次吧,Ct值的范围为15-35。Ct值小于15,认为扩增在基线期范围内,未达到荧光阈值。理想情况下,Ct值与模板起始拷贝数的对数存在线性关系,也就是标准曲线。通过标准曲线,扩增效率为100%时,计算出基因单个拷贝数定量的Ct值在35左右,若大于35,理论上模板起始拷贝数小于1,可认为无意义。
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问
扩增曲线平台期不平,循环增加荧光值下降是什么原因?
Eason老歌迷
有可能是你的仪器不稳定导致的扩增曲线异常。或者是可能是卤素灯老化所致发射光源不稳。或者是考虑仪器或者孔位问题,还要考虑反应体系是否存有气泡。
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问
重组质粒不表达,什么原因?
Eason老歌迷
菌落PCR的假阳性非常高,应该挑取多个阳性菌株,加入抗生素小摇之后将菌液送去测序,然后再选取正确的菌株进行重组表达,因为,还有可能存在载体上根本没有目的基因的情况,当然就不表达了
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问
敲除基因后的基因组与野生型基因组如何比对序列?
Eason老歌迷
可以通过pcr鉴定的方式来确定。也可以用dna序列软件,进行测序结果与野生型序列进行比对,如果发生非3倍数的indel,则说明该细胞系在基因组水平上已经实现了敲除。
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问
请问同源重组引物设计怎么考虑移码呢?
Eason老歌迷
如果你的目的是让目的基因不表达,抗性基因自带启动子不需要考虑移码突变。你的抗性基因表达是从启动子开始的,与之前乱七八糟的无关。
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问
求助|TLR抑制剂(TAK-242)和激动剂(CRX-527)的用法
天一湖医者
TLR抑制剂(TAK-242)常用剂量为0.5mg/kg。激动剂(CRX-527)常用剂量为5-10ug/kg
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问
求助:皮质酮损伤细胞造抑郁症模型,皮质酮应该怎么溶啊?
秋秋欣欣
先用促溶剂后,再加定溶剂:因为我们的实验中用到了DMSO(二甲基亚砜),它是一种促溶剂,所以我们在溶解皮质酮时,先用少量的DMSO(也就几滴)使皮质酮微溶,再加其他试剂(比如d-Hanks、生理盐水、无水乙醇(可能有影响)等)定容配制皮质酮溶液。
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问
小鼠肺洗液怎么做Elisa,稀释方法和血清一样么
bamboopiggy
稀释方法是一样的,但是要做个预实验看看需不需要稀释
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问
在做流式时,如何解决非特异性染色的问题?
秋秋欣欣
降低抗体浓度可以减少非特异性染色
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问
求助。mc3t3细胞系,血清选伊克赛还是BI
balalaLy
我以前养细胞也是用澳洲的,6300一瓶,因为大家都觉得我们这个细胞比较娇妻,后来澳洲断货,换了BI的养着也挺好
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问
水化上样缓冲液II 和III在哪里用
天一湖医者
一般用于二维电泳和双向电泳实验。
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