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甲状腺癌细胞不明原因干瘪死亡
Eason老歌迷
感觉是你的培养基不适合,或者是缺少了某个东西,ph值不对?
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问
这是不是脂肪细胞呢?!
Eason老歌迷
可能是,一般是80%的牛前体脂肪细胞接种后12h开始贴壁,4d后开始向脂肪细胞转化,10d后绝大部分细胞脂滴融合,细胞脂肪含量增加;分离的牛前体脂肪细胞接种后1~2d生长缓慢,3~8d进入对数生长期,9d后进入平台期,之后细胞数目开始下降。经胰岛素诱导分化过程中,会生长的很快
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问
中性粒细胞体外培养聚团
Eason老歌迷
可能有几个原因,一个是细胞离心速度过大或时间太长。或者是你消化不完全的时候,细胞和细胞之间的连接没有分开;消化过度的时候,圆形的细胞容易聚堆,再分开很困难。可能是状态不好、老化的细胞。或者是传代时没有吹打均匀,细胞团多。
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问
抑菌率实验求助
Eason老歌迷
一般不用。早期的血清制备中的滤膜的孔径大于0.22um,不能有效的去除支原体的污染。热灭活可以去除支原体的污染。但是现在血清制备中的终端滤膜的孔径为0.1um甚至小到0.04um,所以血清中一般没有支原体的污染。
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问
斑马鱼茜素红染色求助
Eason老歌迷
这种情况一般因为组织固定时采用了酸性甲醛;或者组织在甲醛中浸泡时间太长;或者久置的甲醛变性分解为甲酸。要么使用新鲜的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一点碳酸钠中和甲酸。对于已经固定的组织可考虑再次固定;对于已经制出的片子,染色前采用5%重铬酸钾溶液浸泡半小时以上,然后自来水漂洗5min,可改善染色
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问
求助:这是金黄色葡萄球菌吗?
Eason老歌迷
显微镜下观察该菌为革兰氏阳性球菌,排列成葡萄串状,也有个别2个或3个球菌相连。根据菌落形态、镜检结果怀疑该菌为葡萄球菌。
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问
求助:SY5Y细胞培养问题
Eason老歌迷
用显微镜观察,看看游动不游动。不游动,它可能是细胞碎片,如果是游动的,就说明有细胞污染。我感觉你这个是传代时机不对,细胞老化,产生的碎片。
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问
关于细胞复苏传代的问题
Eason老歌迷
细胞密集的地方,新生细胞没有办法找到贴壁点,细胞当然会飘起来。同时一些老化了的细胞贴壁能力有所下降,容易被竞争去贴壁的行列,从而飘起来。所以建议你传代的时候把细胞吹散均匀,不要有抱团的。另外就是及时传代,并不是细胞长满才传代,当有个别地方长的过于密集,容易叠加的时候应该就要传代了。
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问
如何在linux系统中循环批量处理序列文件
Eason老歌迷
一、批量在文件某行插入内容: find -type f -name ~undefined.pcf" |xargs sed -i '/aaaa/abbb/' find -type f -name ~undefined.pcf" |xargs sed -i '/aaaa/ibbb/' 其中a表示在包含"aaaa"的行后面一行加入"bbbb";i表示在前面一行加入。 二、批量替换文件内容: find -type f -n
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问
MTT实验
Eason老歌迷
我也遇见过这样的情况,我在同步化24小时以后加药,分不同时间点,短时间点比如4小时,没有这样的情况,但12小时或24小时就出现变黑,有时是个别孔,有时是整个扳子,后来我缩短了同步化的时间,时间点也尽量缩短,就避免了这种现象。当时我的感觉是细胞长期处于无血清状态下已经死亡了。
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问
Western Blot转膜效率低怎么办?
Eason老歌迷
你是用的半干转还是湿转,你的蛋白是多少呢?如果要是大蛋白可以试一试湿转,效果更好。你的转膜液用几次更换呢?也可以增加转膜时间试一试。
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问
WB实验显色或曝光后无条带原因在哪儿?
Eason老歌迷
可能有几个原因,一个是你的转膜没转好,或者是转膜时间太长转过了。二个是你剪膜直接把目的条带剪掉了。三可能是你孵抗体没孵好,或者是一抗二抗选错了。四可能是你的显影操作有问题
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问
westernblot配胶问题
Eason老歌迷
没啥区别,我都是用过的。之前用无水乙醇,后来该用的水。无水乙醇效果更好一丢丢
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问
wb检测蛋白时,过曝的话,结果还可信吗?
Eason老歌迷
建议你重新跑吧。要么降低一下你的上样量,或者是稀释你的抗体倍数,或者是减少你的曝光时间
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问
WB检测蛋白,条带大小与理论大小不相符,什么原因?
Eason老歌迷
如果蛋白大小和预测值有明显倍数关系,那就要考虑一下这个蛋白是不是二聚体或者多聚体啦。
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问
qpcr要测RNA浓度吗orz
秋秋欣欣
需要,逆转录的时候需要根据浓度计算加样量
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问
每次曝出来的片总是中间空心,想不通是为什么
Eason老歌迷
可能是你转膜的时候,你的膜和胶之间有气泡,你没赶走。
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问
如何成功高效的富集聚糖和糖肽以完成糖蛋白分析?
Eason老歌迷
通常使用氨基或者酰胺基柱等极性基团小柱来进行富集。使用MonoSpin Amide可以富集酸性,中性和碱性化合物。通过使用MonoSpin形式整体硅胶小柱。
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问
免疫荧光一定要用共聚焦显微镜看吗?
秋秋欣欣
普通荧光显微镜也是可以看的啊。
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问
想问一下wb对称得条带围着一个中心变浅是因为什么原因呢?
balalaLy
可能是转膜的夹子夹不均匀,导致中间部分比较松,没有把所有蛋白都转到膜上面去
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