实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问A2780细胞形态和状态

汤姆卜丽波

你高倍镜放大看看，我查到的2780是这样的

1 回答357 围观

问在做ELISA实验中，最后要显色多久可以加终止液进行终止，显色的原理是什么呀？

bamboopiggy

看你用的kit的说明书，一般在kit给的范围就可以。

3 回答871 围观

问Elias实验问题寻找？

dxy_082oaia6

如果不是偶然现象每次都这样的话考虑捕获抗体和二抗或者检测抗体可能存在交叉偶然现象可能是所用buffer污染

3 回答305 围观

问测RNA浓度结果为什么要乘以8

bamboopiggy

1.你用什么方法测的？2.测RNA浓度的目的是作什么？3，如果是做反转录，没有8这个说法，一般是nanodrop测得浓度值直接用得。

4 回答395 围观

问转膜marker没有全部转过去

balalaLy

用的多少浓度的胶，胶浓度太大也会导致大分子很难转过去

3 回答1803 围观

问细胞污染

汤姆卜丽波

你看一下它是活动的么，有可能是杆菌

3 回答281 围观

问求助如何提高蛋白质的溶解度

还在陆上surg

水温37度，加点盐，减弱分子间作用力。

5 回答1787 围观

问DTT毒性强吗？为什么我闻了会恶心，我同学不会啊

汤姆卜丽波

总之是有毒的，而且它确实味道很不好，带好口罩做好防护

3 回答3799 围观

问求助：请问细胞实验中，取不同时间点进行细胞增殖的测定，其中时间点0h是什么意思？

汤姆卜丽波

对。就是药物刚加进去就测，相当于空白对照之外的一个对照，为了做曲线用的

3 回答643 围观

问CCK8实验

汤姆卜丽波

如果确实经费紧缺，比如我们。。。那也可以

3 回答513 围观

问从细胞中提取内源性表达的蛋白，按照常规方法做，可是最后银染总是没有条带？多谢多谢！

天雨心晴

首先要确认的是你的目的蛋白是否有被IP下来。最好用western检测一下IP沉淀中是否含有你要的内源性表达的蛋白，有的话再进一步做银染。银染的上样量可以大一些。当然我觉得可能你在IP的过程中出现问题的几率比较大。

3 回答586 围观

问提蛋白加RIPA后泡沫很多？

汤姆卜丽波

吹打的时候注意不打完这样泡沫就会少很多

3 回答718 围观

问NC 膜 PVDF 膜尼龙膜的差异。

天一湖医者

NC膜只可以和单链rna.dna在高盐条件下结合，与dna分子非共价键结合，易丢失dna.而且NC膜很脆，易断，不能反复使用，优点是对探针和蛋白质吸附作用较弱，杂交信号本底低。尼龙膜可以与单链及双键多核苷酸链结合，与DNA共价键结合，可以反复利用10到20次，膜强度高，不易破坏，优点是可以重复使用，碱可以促进DNA与尼龙膜的结合。

3 回答443 围观

问PC12

汤姆卜丽波

这个你好好调一下倍镜，我感觉像是没调对，也可能是细胞残骸

3 回答380 围观

问求脑内皮细胞bend3的培养经验

汤姆卜丽波

你查一下它的血清要求。有的细胞要用高糖，有的用1640有得用Mem都不一样

3 回答1004 围观

问求助求助

balalaLy

我们课题组之前做衰老课题也是体内体外结果不一致，逻辑上说得通就行

2 回答495 围观

问细胞凋亡

汤姆卜丽波

你做预实验嘛，用Cck8做个浓度梯度，然后大致估算最适浓度，最后流式细胞看凋亡

3 回答601 围观

问脂肪酸诱导HepG2细胞脂肪变性

Eason老歌迷

是的，它是外源添加，并不是改变基因层次。

3 回答414 围观

问想请问一下大佬们关于CCD-18co的培养方法

汤姆卜丽波

这样，你可以试着增大血清比例或者用F12试一下

2 回答298 围观

问定量PCR的时候怎么确定cDNA的稀释倍数？

秋秋欣欣

可以做一个梯度稀释，然后qPCR跑一下看

4 回答797 围观

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