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293T细胞传代以后过夜培养基变粉?
Eason老歌迷
有污染了吧,看着像是细胞污染了。
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问
求问,对牛肉膏蛋白胨培养的细菌进行结晶紫染色后,为什么显微镜视野下会出现杆状物体
申东熙老伯
杆状物体可能是由于结晶紫沉淀,不要回收利用结晶紫,尽量吸上面的结晶紫染色。
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问
悬浮细胞做免疫荧光如何贴壁
Dr_劉医生
都是细节问题!1. 爬片,一定要注意密度密度!!细胞不能太多,连成一片那种细胞很容易在 PBS 漂洗步骤大片脱落。其次细胞也不能太少,这样细胞也会被洗掉,拍照效果不理想。正常的细胞密度最好在 60-70% 左右即可,在显微镜下可以看到细胞一个一个的形态。有些细胞不容易贴在玻片上,会导致细胞形态和培养瓶内不一致,可以用明胶或多聚赖氨酸预处理一下玻片,再接种细胞即可;2. 固定固定,细胞长好后一定固定
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问
免疫荧光目的蛋白不好找,找到了要么拍不出来,或者拍出来曝光时间特别长,特别糊,一直动
此用户已注销
通透剂作用的时间或强度、换用其他抗体,使用正确的抗体。
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问
EMSA实验同样的探针,为何每次跑出来,下面free probe 亮度不一样
bamboopiggy
只要是人操作,就会有差异的。只要你实验结果能说明问题,不要强求非要一致。
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问
DNAMAN进行多序列比对的时候结果怎么看呢?
bamboopiggy
应该看序列是不是都能对应上,对应不上的位置会有黑线
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问
flox/flox小鼠与KO小鼠有什么区别啊
bamboopiggy
flox/flox小鼠与特定的cre小鼠交配,就可以得到ko小鼠,分为全身的和tissue-specific的。
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问
Sw480细胞传代不贴壁
bamboopiggy
看你第三张图片,感觉是不是你用的培养皿是假货,导致细胞不贴壁,你要么加点促帖壁试剂试试,要么换个别的实验室的皿试试。
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问
再次求助生信大佬|关于生信实验验证
bamboopiggy
是不是你们没有相应的组织啊?没有组织,怎么做验证?
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问
请教,第一张图中的黄色一团是什么?细胞中有的时候有好多团。第二张是刚复苏后24h的细胞,好多黑点点
bamboopiggy
黄色的是细胞抱团了,可能你消化处理的不够时间。 复苏细胞的黑点点,你传代看看,还有没有,可能是细胞碎片。
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问
求教 抽提质粒后大小与预期不符。要的质粒大小在6000多bp抽提后4000多,浓度有400ng/ul,抽提了两次都这样是什么原因
bamboopiggy
你是酶切后跑胶还是质粒直接点的胶?如果质粒直接点胶的话,超螺旋的结构跑的比线性的要快。
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问
测点熔点时,遇到加热过快怎么办?
Eason老歌迷
一般要求缓慢升温,仔细观察。升温速度过快,会导致测定值偏高。升温速度过慢有影响测定效率,延长测定时间。你可以在外面再套个管,管里装上升温慢的溶液。
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1389 围观
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问
免疫荧光实验中间接标记会放大信号是什么原因?
bamboopiggy
间接检测方法通常有着更高水平的灵敏度,并产生更强烈的信号。信号经过间接方法放大,因为至少有两个标记的二抗与每个一抗结合。不过,二抗的使用需要额外的封闭步骤和对照。
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1103 围观
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问
有养过EA.hy926的朋友嘛,养的状态不行求助
你好几和户
这个也不是很好养,记得用DMEM+10% FBS,最初传入瓶中的细胞不要过稀,会影响细胞状态的。
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608 围观
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问
脑组织解剖结构
snow4848
脑干 中脑 小脑。脑端(及是大脑左右半球)延髓、脑桥
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783 围观
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问
求助求助
Dr_劉医生
这个检索关键词查文章就行。小白先看中文了解概述,再去找英文。近年的学位论文方法学部分更细致,供参考:王志盛. 黄连素对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM的作用研究[D].河南中医药大学,2020.DOI:10.27119/d.cnki.ghezc.2020.000050
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问
【求助】MEK1/2的磷酸化位点
bamboopiggy
应该是不一样的,这两个位点都能查到对应的抗体,所以应该是不一样的。
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问
钙成像的Area under the curve用Origin2018软件怎么分析呢?
红嘴小花猫
如果你要分析钙成像峰值大小体,可以使用函数来判断,取纵坐标数值。
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问
请教:B16细胞的传代
dxy_l67kvfd7
消化后直接传代就可以,消化过头或者冻存才需要离心
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418 围观
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问
求助免疫组化两种洗脱方法的效果?
snow4848
我们比较喜欢抗体洗脱的好,因为常用
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