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问
请问有人知道NapSul-Ile-Trp-CHO(icL)的作用机制吗?
Eason老歌迷
我看到过一篇文献,就是讲这个icl的,”溶酶体蛋白Cathepsin L在小胶质细胞激活中的作用”
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问
Elisa实验包被抗原,封闭之后可以保存板子下次再用吗?
府宅
37℃的条件下放置15天都没有很大的影响,关键要看包被的原料稳定性
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问
脑缺血再灌注(MCAO)大鼠实验时间点设计问题
Eason老歌迷
这个就是前期做大量预实验,或者是你查看文献可以获得。我们都是选几个时间点,然后观察各项指标,然后选差别最大的那个时间点去进行后续实验。
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问
显微镜拍照问题
balalaLy
就是先拍一张低倍的照片,一般4x或者10x,然后再在低倍照片中找一个视野就是框出来的位置,拍一张高倍的40x倍或者100x照片
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问
wb样本孔白色条带 marker是黑色的
麻黄连翘赤小豆
看样子是“反影”现象,可能是信号太强,就像是照相的时候曝光过度了,建议提高一抗和二抗的稀释倍数,缩短抗体孵育时间,如果是用ECL化学发光液的话换成低敏的会改善这种现象
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问
目的蛋白表达破碎时用pbs表达在沉淀,换成buffer a蛋白又表达在上清是为什么呢
冷泉港蛋白
1.纠正下 不是蛋白表达在上清还是沉淀,是溶解,我感觉这样说更合适2.你的蛋白应该是疏水性较强,以包涵体的形式存在,简单的说就是形成了多聚体。3.用pbs溶解不了蛋白,因此在沉淀里面;用buffer a,含有变性剂或表面活性剂,破坏了蛋白之间的疏水作用,溶解了部分蛋白出来。
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问
膜片钳,这个试验好做吗(第一次接触呀)
府宅
膜片钳试验不好做,无论是实验前的准备工作,还是封接、记录,一定要细致、有耐心,。
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问
PCR温度剃度如何快速摸索出来
illusio
一般情况下合理的退火温度约是从55℃到70℃。退火温度的设定一般要比引物的Tm低5℃。实验过程中设置退火温度时应比引物产品说明书标明的退火温度高出1℃~2℃最佳
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问
琼脂糖电泳跑出的条带怎不是那么好看,谁有高招?
锟1112
充分融化琼脂糖,提高浓度,降低电压,把染料加在产物里(部分染料可用)
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问
co ip反拉拉不下来
illusio
可能是反拉的抗体不好用,也可能是两者确实有结合,只是反拉蛋白的抗原表位被复合物掩盖,可以尝试使用强度高一点的裂解液,破坏部分的空间构想,再试一次
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问
【求助】外泌体蛋白跑WB的问题
whilt-shirt
膜蛋白是不能煮的,只能加loding后直接上样
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问
弥散性糖基化蛋白纯化后大小变了
illusio
有可能是蛋白降解了,蛋白降解了会出现多带现象,或者蛋白有其他修饰形式比如甲基化、磷酸化
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问
流式细胞学细胞状态问题
Eason老歌迷
可能是你的细胞传代时候时机不对,细胞老化了。也可能是你细胞发生了污染,比如说支原体污染黑胶虫污染。
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问
H9C2心肌细胞提RNA做QPCR内参选择
illusio
β-actin作为mRNA检测内参基因的范围比较广泛(除心肌,骨骼肌,平滑肌,特定肿瘤和组织之外);广泛用做western内参;GAPDH由于受代谢及影响因素较多,一般不用mRNA检测内参,广泛用做western内参。 有文献H9C2心肌细胞用以β‑tubulin为内参。可以多去看一下文献
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问
小鼠mcao后易死亡
Eason老歌迷
有几个原因,一个是麻醉不能过深,不然在分离颈总动脉,牵拉迷走神经和气管时,动物易死亡。二个是如果插线有困难,勉强进入后,动物损伤重,易死亡。
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问
RT-PCR实验内参问题
illusio
可能第一遍的时候RNA降解严重,或者逆转录失败
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问
请问烟草注射农杆菌瞬时表达的T-DNA整合进基因组么?
Eason老歌迷
有,我之前看过一篇文章,“农杆菌介导的基因瞬时表达技术及其应用”,讲的很详细。
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问
师姐构建的Bacmid(重组杆粒)只剩下10微升左右,老师跟我说可以重新转
Eason老歌迷
是不是你转化的过程,哪一步没做好啊?之前师兄转化时间没掌握好,也是啥也不长。
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问
以某种项目的定量结果为因变量,分析该变量用于某种疾病诊断的影响因素,如肝肾功能、是否服药、标本是否溶血等,应使用哪种分析方法?谢
Eason老歌迷
可以用单因素风险分析,比如说做一个森林图,看它的置信区间。
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问
小鼠给药后活力下降,出现攻击行为
任医生168
与药物有关吧!药物的化学成分、浓度、注射速度,部位有关。
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