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        co ip反拉拉不下来

        相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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        搬砖小兽

        做co ip实验时正拉可以拉下来,但是反拉拉不下来,是不是说明蛋白不互作,正拉的结果是假阳性。

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        3 个回答

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        用A抗体IP, A蛋白WB检测有信号,B蛋白无信号。我想的可能解释是,A蛋白与B蛋白形成复合体后掩盖了A蛋白的抗原表位,因此A蛋白IP后,只能将未形成复合体的A蛋白拉下来,而形成复合体的部分则无法IP下来。

        user-title

        搬砖小兽user-title

        谢谢您的回复,那这种情况该怎么解决呢?

        user-title

        illusio

        有帮助

        可能是反拉的抗体不好用,也可能是两者确实有结合,只是反拉蛋白的抗原表位被复合物掩盖,可以尝试使用强度高一点的裂解液,破坏部分的空间构想,再试一次

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        bamboopiggy

        有帮助

        反拉拉不下来,不一定是没有作用,你所有的对照都做好了?b抗体没问题?是能做ip的抗体?

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        搬砖小兽user-title

        我用商品化标记好的磁珠拉的,没有自己标珠子

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