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        目的蛋白表达破碎时用pbs表达在沉淀,换成buffer a蛋白又表达在上清是为什么呢

        相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

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        dxy_wry2lod2

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        4 个回答

        user-title

        冷泉港蛋白

        有帮助

        1.纠正下 不是蛋白表达在上清还是沉淀,是溶解,我感觉这样说更合适

        2.你的蛋白应该是疏水性较强,以包涵体的形式存在,简单的说就是形成了多聚体。

        3.用pbs溶解不了蛋白,因此在沉淀里面;用buffer a,含有变性剂或表面活性剂,破坏了蛋白之间的疏水作用,溶解了部分蛋白出来。

        user-title

        哎呀呀呀呀哎

        有帮助

        buffer a 是什么组分的呢,会不会含有变性剂啥的

        user-title

        dxy_wry2lod2user-title

        buffer a包含tris,EDTA,NaCl,甘油及少量的dtt,但是一般溶解包涵体是用高浓度的dtt,而buffer a里是极其少量的

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        有可能是蛋白在两种试剂中的溶解度不同导致的

        user-title

        illusio

        有帮助

        可能表达的蛋白疏水性比较强,可以改变一下条件,比如温度、盐浓度等

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