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荧光定量PCR检测LC3-I/II
balalaLy
LC3B相当于LC3-11,一般是检测LC3B的rna水平
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pDONR221质粒酶切不完全求助
Eason老歌迷
可能是你的酶切时间有些长,因为定性试验,产物的量不甚准确,建议将酶的量做一个梯度,但不是将酶浓度稀释。或者是镁离子浓度可能有些不适合,建议做一下调整。
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各位大佬,请问这个是胰岛细胞吗以及为什么DTZ染色那么浅?
Eason老歌迷
应该是是胰岛细胞。可能是你的细胞数量不够啊,你的dtz是用dmso配的啊,那你可以用dtz溶于无水乙醇试试染色效果怎么样。
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菌株鉴定
Dr_劉医生
写rRNA的转录鉴定结果,而且你上传了NCBI数据库后会分配ID号,到时投稿会用到;至于你说的和全基因组序列的结果不一样,是不是你看的是碱基是DNA的,而鉴定是转录本;还一个确定好sapien还是animals,一般情况不会出现两种菌。
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问
关于负向链启动子构建质粒的问题
Dr_劉医生
当然需要,你用的是反向互补链,而且你启动子选的也是对,一般都是上游+2000bp;双荧光素酶就是得把靶基因插在目的基因前面,然后转录基因才会激活启动子,从而表达荧光素酶基因;
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问
In-fusion反应液可以直接PCR验证吗
Eason老歌迷
可以!你要是p不出来,可以加点Cloning Enhancer,消除了PCR反应液中引物二聚体和dNTP等的影响试一试,我是可以p出来的。
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问
知道中位生存时间与生存时间上下限及人数如何计算95CI
Eason老歌迷
如果知道生存时间和人数,可以利用Greenwood公式进行计算,经proc lifetest过程获取各时间点的生存率及标准误,生存率和标准误对应的变量为Survival和StdErr,计算公式为: Survival **exp(±1.96*(StdErr/(Survival*log(Survival)))) 其中log(Survival)为以e为底的自然对数函数。
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回归分析求助
Eason老歌迷
初发HfH与初发房颤发生率及%VP的关系用Cox比例风险模型进行评估,以事件的时间作为因变量,并以%VP作为时间
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求助求助
Eason老歌迷
做过。推荐你酵母表达系统。目前甲醇酵母主要有H Polymorpha,Candida Bodini,Pichia Pastris3种。以Pichia Pastoris应用最多。甲醇酵母的表达载体为整合型质粒,载体中含有与酵母染色体中同源的序列,因而比较容易整合入酵母染色体中。大部分甲醇酵母的表达载体中都含有甲醇酵母醇氧化酶基因一1(A0x1),在该基因的启动子(PAXOI)作用下,外源基因得以表达
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烟草脆裂病毒TRV VIGS求助
Eason老歌迷
感觉是不是你的注射浓度量有点大?刺激到了叶片
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同源重组的引物退火温度该如何计算
Eason老歌迷
退火温度=4×(G+C)+2×(A+T)-(5~知8) 只是粗算,有时不灵,但比道较简便。或者用primer5(or oligo6)计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认为这个值就是退火温度,我的经验再加2 or 3度最好。你的合成引物的单回子上也有个Tm,减去5~8也可。
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问
转录因子结合位点具体包括?
Eason老歌迷
不是啊,结合位点有很多,你可以用软件去预测。打开网址:https://jaspar.genereg.net/,在搜索框里输入转录因子NFAT,点击Search。选择一个或多个ID文件,在SCAN序列框中输入FASTA格式文件,得到27条转录因子NFAT与IL17A的结合位点,Strand -没有特殊意义,选择Strand +即可。JASPAR数据库检索出的结合位点来源于已发表的ChIP实验等,主要
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问
各位科研大佬们帮我看看,有没有自噬小体或者溶酶体
Eason老歌迷
看着这几个大泡有点像里面有自噬小体存在。
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大鼠主动脉平滑肌细胞形态是否正常
Eason老歌迷
看着有点老化,你可以减少传代消化次数,消化次数多了,对细胞也是一种损害。
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脐静脉内皮细胞 淋巴管内皮细胞
Eason老歌迷
因为淋巴管它不能繁殖。而脐静脉内皮细胞是一种干细胞,能无限次传代,易于实验操作。
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悬浮细胞培养
whilt-shirt
是不是离心的温度高了,一般都是选择4℃离心
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胰腺HE染色
Eason老歌迷
看着像是胰岛,你可以再做几次染色看看。
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实验求助
Eason老歌迷
你可以加碱,这样可以增加中链脂肪酸的水溶性。
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HKC不好养
Eason老歌迷
你是不是细胞传代的时机不对,导致细胞老化死亡,或者是你的消化时间太长了。
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药物干预细胞能否说直接就是模仿某种疾病
balalaLy
打个比方说我做衰老,用过氧化氢处理细胞模拟衰老模型,用细胞模型做各种表型、功能、分子调控,在这个基础上再用衰老的动物模型进一步验证。这是不同水平的实验,细胞水平是最简单的,动物实验做得好,文章可以上一个台阶。
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