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问
请问WB电泳时 marker消失
vlinine
marker消失显然是由于marker降解造成的
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问
小白求翻译
Dr_劉医生
发夹适配器,一种DNA双链的连接方式,类似发卡(如图片两端)
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问
PCR电泳无扩增条带
灵枢天问
如果电泳没条带那是不是你加样有问题引物用错了?至少有一点模板吧
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问
关于实验用试剂还是标准品。
你好几和户
配置标准溶液进行处理,有时也是颇为麻烦,而且效果可能并不好,目前有一些厂家试剂在简便操作,和抑制效果方面有不俗的表现,也是可以用的。
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问
EMSA最后曝光的片子非常脏是怎么造成的?
bamboopiggy
感觉你洗膜洗的不好,最好用大一点的容器洗。
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问
请教个统计学问题
vlinine
分析x属性时,将非x属性的人(y+z)看作一个整体,是可以的
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问
毕赤酵母胞内表达
灵枢天问
换个抗体吧,你再查查文献看看有没有特异性更高的抗体
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问
已知上游引物ttaccaatgcttaatcag,计算其Tm值?
bamboopiggy
TTACCAATGCTTAATCAG 我直接在vectorNTI中计算的是37.7
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问
做单基因的差异基因的时候需要放正常组样本吗
土井挞克树
需要正常组,后续做通路对比也会需要正常组。
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问
γH2AX焦点数目少是为什么?
bamboopiggy
γH2AX是做dna damage的,你有没有加个阳性的对照看看,是不是你的抗体浓度不合适。
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问
细胞活力
bamboopiggy
你怎么确定你6孔板和96孔板细胞的密度是一样的?一般,你要控制加液体的体积,药物浓度,以及细胞数,即使计算出来细胞的活力在50%,也是个相对数,大概在6孔板中,可能活力在50-70%,虽然细胞死了,已经没法和cck8反应了,但是不一定是飘在培养基中,可能还是贴壁状态。肉眼看是看不出来的。
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问
求助|pha刺激pbmc后细胞贴壁,完全吹不下来
bamboopiggy
是的,刺激以后帖壁,如下要弄下来,就胰酶消化。
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问
单克隆抗体
灵枢天问
你是用的小鼠么。换一个好一点的分离液,然后整体操作一定要快,分离液很容易挥发,小心吸取你要的细胞层,这样杂质会少很多
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问
悬浮细胞的涂片难题!!科研小白在线求助
bamboopiggy
是不是你细胞的状态不好?一般涂片,你要使多大的劲啊?
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问
哪位同学知道内质网应激检测指标的磷酸化位点吗
土井挞克树
PERK活化后能够特异性地磷酸化eIFZα的51位的丝氨酸,这个位点可以被检测到
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问
求问这个细胞是真菌污染了吗?
bamboopiggy
是污染了,你别用了,换新的吧。
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问
RNA稳定性试验,加放线菌素的浓度,PCR结果如何计算呢?
土井挞克树
A260下读值为1表示40 ug RNA/ml。样品RNA浓度计算公式为:A260 x 稀释倍数 x 40 ug/ml。然后以RNA的浓度来计算PCR
2 回答
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问
求各位大神,带带!本人刚接触蛋白实验,需要做EMSA与footprinting,希望大家推荐。谢谢
博纳百川
凝胶迁移实验是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术,这项技术是基于DNA 蛋白质或RNA 蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳中有不同迁移率的原理。本实验是将提取到的蛋白粗提液,与生物素标记的DNA一同保温,在非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA复合物比非结合的探针移动得慢。EMSA中结合滞后条带的有无,以及量的多少可反映出DNA结合蛋白与DNA探针的结合
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问
请教限制性内切酶答案,如何解答
bamboopiggy
你直接去NEB或者是takara的官网上去看就好,里面所有的介绍都有,一般常用的限制性内切酶的适宜温度是37度,切出来的大多是粘性末端。
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问
求助皮肤组织提蛋白方法
一叶障目321
推荐低温匀浆器,皮肤匀浆大概是每次60s,四次,60hz,充分匀浆后会更好裂解
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