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问
标准品并不是都可以做绝对定量分析
土井挞克树
是的,标准品有时只能作为参考,有的实验加入标准品后反倒是出现相反的结果
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问
纯化的蛋白做coIp
土井挞克树
考虑是杂质结合,既然是特异填料,一般不会出现这种情况
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问
请问跑PAGE条带有问题什么原因
bamboopiggy
你蛋白浓度有点高了,降一下蛋白浓度试试。
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问
请问一下非洲猪瘟的红细胞吸附实验的原理与步骤是什么?
土井挞克树
红细胞吸附试验(HA)ASFV 的红细胞吸附试验是该病毒特有的检测技术,其他猪源病毒在白细胞培养物中不存在红细胞吸附特性。当病毒在这些培养物中复制时,多数ASFV 毒株会产生红细胞吸附反应(HAD),在感染的白细胞周围吸附猪红细胞形成 “玫瑰花环”。但是在没有发生红细胞吸附反应的时候出现细胞病变(CPE),需采用FAT或PCR方法辅助诊断。
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问
基因敲除鼠敲除目的蛋白基因 受刺激为啥还能表达目的蛋白
bamboopiggy
你最好把文献贴上来,基因敲除分为全身敲除和组织特异性敲除,这两者之间就有很大区别。
4 回答
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问
细胞实验中,AMPK抑制剂选择浓度时,如果用CCK8检测,怎么选择浓度?
balalaLy
抑制剂的使用说明里一般有推荐浓度,再参考一下相关文献,在推荐的浓度区间根据自己的细胞特点摸索一个合适的浓度
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问
荧光多肽亲和力的测定可以用荧光酶标仪测荧光强度来实现吗
土井挞克树
我觉得你这个思路是可行的,但是你在没有标准度的情况下,如果你首次测定的最大浓度有问题,那么后续实验结果则不能保证正确
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问
ELISA 洗板的时候枪头混用了是不是会影响结果
燚s6YUV
会影响结果的。加样的时候枪头肯定不能混用,然后加工作液的时候也不要接触孔壁,加洗涤液的时候一般我们都是用排枪,也是枪头不重复使用的。
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问
大家做过抗菌肽的体外血浆稳定性实验么
土井挞克树
因为抗菌肽自身稳定性差,一般会用到抗菌肽类似物进行实验,要得到抗菌肽类似物可以用非天然氨基酸Sar(氮甲基甘氨酸)、D-Ala和相应D型氨基酸对polybia-MPI逐个扫描替换,通过多肽固相合成法合成新类似物,这种新类似物的稳定性好很多
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问
求助!请问建立标准曲线时,如何配制母液?然后怎么用母液稀释至各种浓度的溶液呢?谢谢!
灵枢天问
你可以直接配置你所需的最大浓度400ug/ml,然后分别用溶剂稀释至低浓度即可
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问
小鼠骨髓干细胞-全骨髓法,骨片法,求助!
Dr_劉医生
首先你P0原代就出现问题,是不是考虑骨髓取材的部位?当然密度梯度离心法也可能导致细胞流失;现你换了贴壁分离的方法,依旧没看到,所以我还是倾向于骨髓组织取材制备的问题;最后那个传代建议使用胰酶浓度为0.05%进行消化。消化每t25培养瓶加胰酶1ml。消化时间约1-2min内,t25培养瓶培养液约7ml完全培养基。
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问
关于鼠尾胶原蛋白Ⅰ型铺板
whilt-shirt
基本上是看不到的,不过可以刮下来
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问
目前肿瘤药物开发领域最新进展
piperer
肿瘤耐药细胞株原位接种成模的没做过,买成品株比较方便
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问
组胚求助科研大佬HE染色
土井挞克树
实验手册上建议是30min-1h(小组织块),但是如果冲水前的过水步骤省略,需要再延长20-30min
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问
短肽能否作为原料直接参与蛋白质的生物合成
土井挞克树
当然可以了,短肽就是氨基酸拼成的,你甚至可以多个短肽连接成一个蛋白,现在的技术可以做到的
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问
CD31染小鼠肝脏
piperer
超过70%的p16细胞存在CD31,提示它们是血管内皮细胞。
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问
脊髓小胶质细胞疑问
土井挞克树
CD11b 与 CD45 组合标记可用于区分小胶质细胞与巨噬细胞。静息小胶质细胞表面标记物为 CD11bhi 和 CD45low,而巨噬细胞为 CD11bhi 和 CD45hi。
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问
对鼠脾脏中提取的T淋巴细胞体外培养有些疑惑想要求解答
dxy_9f0d5rr
我觉得应该用特定培养基,可以使其更好的被保存以供适用
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问
外泌体的使用,静脉注射外泌体后大鼠出现血尿(肾损伤?)
土井挞克树
主在急性肾损伤小鼠模型中观察到,在损伤的肾组织中出现了外泌体的富集,而对照组无此现象[38]。外泌体在病理改变的组织中具有聚集性的机制尚不清楚,考虑可能与外泌体表面表达特异性的受体被炎症细胞识别有关,也可能因炎症和受损组织通透性增高所致。
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问
FITC 标记二抗以合适浓度稀释于 PBS,一般浓度是多少啊?
Dr_劉医生
二抗的常用范围是1:1000~1:5000,我一般用2000的就够了,具体可以看下试剂盒说明书
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