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问
标准品并不是都可以做绝对定量分析
土井挞克树
是的,标准品有时只能作为参考,有的实验加入标准品后反倒是出现相反的结果
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问
纯化的蛋白做coIp
土井挞克树
考虑是杂质结合,既然是特异填料,一般不会出现这种情况
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问
northern blot 内参探针
Dr_劉医生
对呀,和跑DNA的southern blot基本一样,在数据库检索序列片段,看外显子位置;但因为northern做的RNA是单链,需要和互补的RNA探针引物结合;所以在做northern的时候最好选择cDNA探针,若选用DNA探针,则尽量设计在外显子部分。此外, 探针长度最好在100-1000bp之间,大于1000bp则背景很高,很难区分异源序列
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问
细胞实验中,AMPK抑制剂选择浓度时,如果用CCK8检测,怎么选择浓度?
balalaLy
抑制剂的使用说明里一般有推荐浓度,再参考一下相关文献,在推荐的浓度区间根据自己的细胞特点摸索一个合适的浓度
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问
组织冰冻切片ROS荧光染色,细胞形态完全没有了,完全一团糊,有谁知道啥原因吗
土井挞克树
你这个视野没有看到细胞呀。那么有可能细胞没染上,有可能细胞死亡,不过倾向于染的都是杂质,没看到细胞
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问
请问293细胞在3.5厘米皿长满有多少细胞?
bamboopiggy
你看要长多密了,293细胞比较小,3.5cm的皿长满,可以到3-10x10^6
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问
荧光多肽亲和力的测定可以用荧光酶标仪测荧光强度来实现吗
土井挞克树
我觉得你这个思路是可行的,但是你在没有标准度的情况下,如果你首次测定的最大浓度有问题,那么后续实验结果则不能保证正确
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问
ELISA 洗板的时候枪头混用了是不是会影响结果
燚s6YUV
会影响结果的。加样的时候枪头肯定不能混用,然后加工作液的时候也不要接触孔壁,加洗涤液的时候一般我们都是用排枪,也是枪头不重复使用的。
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问
求助!请问建立标准曲线时,如何配制母液?然后怎么用母液稀释至各种浓度的溶液呢?谢谢!
灵枢天问
你可以直接配置你所需的最大浓度400ug/ml,然后分别用溶剂稀释至低浓度即可
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问
求大神回复:”生物安全柜的类型和区别“
土井挞克树
一级生物安全柜主要是保护工作人员和环境的,对于样品的保护作用不大,本身没有风机主要是依赖外接的通风管中的风机来带动气流,但是由于不能保护样品,所以使用很少。二、二级生物安全柜: 这是目前广泛流行的一种类型,按照入口气流风速、排气方式和循环方式主要可以分为A1、A2、B1、B2四种类型,可以对工作人员、环境、样品进行很好的保护。三、三级生物安全柜: 三级生物安全柜主要是为4级实验室的生物安全等级
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问
小鼠骨髓干细胞-全骨髓法,骨片法,求助!
Dr_劉医生
首先你P0原代就出现问题,是不是考虑骨髓取材的部位?当然密度梯度离心法也可能导致细胞流失;现你换了贴壁分离的方法,依旧没看到,所以我还是倾向于骨髓组织取材制备的问题;最后那个传代建议使用胰酶浓度为0.05%进行消化。消化每t25培养瓶加胰酶1ml。消化时间约1-2min内,t25培养瓶培养液约7ml完全培养基。
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问
细胞状态不好
土井挞克树
我觉得你的细胞太多了,肿瘤细胞繁殖快,需要定期梳理,可以考虑多用培养基。
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问
关于鼠尾胶原蛋白Ⅰ型铺板
whilt-shirt
基本上是看不到的,不过可以刮下来
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问
目前肿瘤药物开发领域最新进展
piperer
肿瘤耐药细胞株原位接种成模的没做过,买成品株比较方便
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问
组胚求助科研大佬HE染色
土井挞克树
实验手册上建议是30min-1h(小组织块),但是如果冲水前的过水步骤省略,需要再延长20-30min
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问
短肽能否作为原料直接参与蛋白质的生物合成
土井挞克树
当然可以了,短肽就是氨基酸拼成的,你甚至可以多个短肽连接成一个蛋白,现在的技术可以做到的
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问
CD31染小鼠肝脏
piperer
超过70%的p16细胞存在CD31,提示它们是血管内皮细胞。
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问
脊髓小胶质细胞疑问
土井挞克树
CD11b 与 CD45 组合标记可用于区分小胶质细胞与巨噬细胞。静息小胶质细胞表面标记物为 CD11bhi 和 CD45low,而巨噬细胞为 CD11bhi 和 CD45hi。
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问
对鼠脾脏中提取的T淋巴细胞体外培养有些疑惑想要求解答
dxy_9f0d5rr
我觉得应该用特定培养基,可以使其更好的被保存以供适用
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问
FITC 标记二抗以合适浓度稀释于 PBS,一般浓度是多少啊?
Dr_劉医生
二抗的常用范围是1:1000~1:5000,我一般用2000的就够了,具体可以看下试剂盒说明书
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