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问
做RT-qPCR大家组内差异大吗?是如何解决的啊?
灵枢天问
一般来说,操作没问题的话三组重复ct不会超过0.5
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问
脱脂奶粉、无蛋白快速封闭液、BSA封闭液那个好用?
balalaLy
脱脂奶粉是最常用的,没有哪个最好用,得根据抗体的特性,有些抗体随便用哪个都可以,有的就得用BSA或商品化的封闭液。
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问
wb电泳压不齐
balalaLy
内槽电泳液漏了,导致电压不稳,电泳过程中要确保电泳液高于玻璃短板以上,电流回路才能是通的。
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问
分子量不同的多糖是不同种物质吗
灵枢天问
如果都是单体的话有可能物质不同
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问
做WB,结果一直这样,到底什么原因呀!?
申东熙老伯
只有marker,可能是转膜转过了也可能蛋白降解了没目的条带。
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问
Dil染外泌体步骤
土井挞克树
a)接种适量数目的细胞,37°C 培养过夜。b)去除培养基,离心收集细胞,加入 PBS 洗涤 2-3 次,每次 5 分钟。c)加入对应浓度 Dil 工作液 (5-10 μM),室温孵育 30 分钟。d)400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。再次加入 PBS 洗涤细胞 2-3 次,以充分去除未进入细胞内的Dilf)用无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,在荧光显微镜或流式细胞仪下检测
1 回答
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问
碘酸钾怎么溶解
灵枢天问
你试试万能溶剂dmso看可不可以
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问
细胞培养
balalaLy
有可能是细胞团块,这个细胞本身就是喜欢抱团生长,可能是传代的时候没有消化开
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问
Fluo-4AM和DAPI双染
灵枢天问
还好,一般都是可以进去的,需要用多聚甲醛固定一下然后分别染色
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问
在做实时荧光定量PCR时扩增效率低是怎么回事儿?
土井挞克树
可能是模版提取过程中残留的抑制PCR反应的物质在起作用,建议你把模版稀释几倍试试。引物量要适当,一般在0.1~0.2微摩
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问
请问大家知道“肿瘤细胞异位定植”吗,能否解释一下,以及有没有相关文献?
灵枢天问
异位定植就是把肿瘤细胞接种到其他种属或者同一种属不同位置
3 回答
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问
mtt测生长曲线
balalaLy
可能是细胞数太少或者是孵育时间太短了
3 回答
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问
PCR鉴定不出结果
bamboopiggy
1.先确定你的引物没有问题,2,确定碱裂解法,得到的dna,可以直接用于pcr,而不需要纯化。
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问
直接接触共培养的细胞免疫细胞化学icc染色
灵枢天问
就短不就长,长时间染色会对细胞形态和功能产生影响
2 回答
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问
免疫荧光破膜条件不小心使用了5%的triton 室温一小时会有影响吗
灵枢天问
浓度有点高了,可能会导致破膜过度,会有非特异性荧光
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1594 围观
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问
请教免疫组化样本量
灵枢天问
我们做一次最少要达到四五十张片子,因为中间会有很多问题,越多越好
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问
小鼠腹水纯化出来的抗体有假阳
灵枢天问
假阳性其实本来就很难避免,因为腹水有可能会伴随炎症
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702 围观
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问
哪个大神不吝赐教,能帮帮忙看一下怎么回事,万分感谢
灵枢天问
有可能是样本本身不均一,没有混合好
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问
2种蛋白之间相关关系的实验技术
申东熙老伯
酵母双杂交系统,适用范围:已知一种蛋白X,在体内筛选与其相互作用的蛋白。
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507 围观
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问
求助:药物比如褪黑素和肿瘤细胞的共培养,浓度梯度一般怎么分组为好?
青云羡鸟飞KN22
预实验先从10倍稀释开始,进行相应的验证之后选择良好继续细分
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