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问
求助WB 大分子条带消失的原因?
huarenqiang5
主要考虑以下几点原因:1)胶的浓度与目的蛋白的浓度不对应;2)蛋白质降解;3)上样量过多或过少及样品弥散。
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问
求助289kDa蛋白转膜条件及分离胶浓度
huarenqiang5
289KDa蛋白转膜建议用 4%的浓缩胶,6%的分离胶,湿转140v恒压3h。
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问
组织样品如何提取mRNA
huarenqiang5
(一)动植物总RNA提取-Trizol法 1、将组织在液N中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml Trizol液研磨,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。 2、研磨液室温放置5分钟,然后以每1mlTrizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒。 3、取上层水相于一新的离心管,按每ml
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问
污泥中的酶可以提纯吗?
土井挞克树
可以,但是要先确认酶含量,然后进行提纯
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问
配体外转录体系时模板加入的时机
土井挞克树
在buffer之前加,不然转录容易失败
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问
粪便非靶向代谢组前处理
土井挞克树
去离子水洗超声,再用甲醇润洗。
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问
质粒提取浓度65—99 ng/ul,浓度低吗
申东熙老伯
质粒浓度不高,但是上样量够了,如果正确的话肯定是很亮的条带,你这个质粒不太正常...
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问
肺纤维化小鼠造模方法?
土井挞克树
目前用于模型制作的诱导剂很多,如博来霉素、百草枯、高浓度氧、石棉以及放射线等均可以引起肺部损伤,最终导致肺纤维化,其中以博来霉素最为常用。
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问
骨髓细胞做凋亡的qp一般需要做哪几个基因?
天一湖医者
主要包括Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w、Mcl-1等
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问
MSC需要的试剂???
dxy_xextz7w2
用的DEME培养基,胰酶,血清
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问
有没有接受英文文章的中文期刊
huarenqiang5
可以投《医药卫生 》双语版这个 。
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问
有没有做过cell free表达蛋白的大神!
sswei
无细胞技术(cell-free)蛋白质表达上的应用,作为近年来单独列出的蛋白表达系统,主要用于表达膜蛋白等难以在细胞内获取的蛋白。膜蛋白在细胞间联系、表面识别、细胞骨架接触、信号传导、酶活性及物质运输中扮演了重要角色。由于其具有多种细胞功能,膜蛋白是非常理想的药物靶标。但是,膜蛋白的其复杂的优化过程使得纯化非常困难并且耗费时间。无细胞技术可以用来来获得高得率的可溶性的膜蛋白。在无细胞技术 无细胞技
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问
PC12细胞莫名死亡
天一湖医者
培养基污染,耗材污染,环境污染,培养箱污染,细胞冻存时污染,人为操作污染,一切都有可能
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问
基因回补具体实验步骤
huarenqiang5
副溶血弧菌基因回补实验方法的建立 重组质粒的构建和鉴定 利用限制性内切酶Xba I和 Hind Ⅲ对载体pBAD33和目的基因片段aphA、 opaR分别进行双酶切,将aphA和opaR基因酶切产物和质粒酶切产物按6:1摩尔比,经TDNA连接酶4℃连接12 h。连接产物化学转化入E.coli DH5a感受态细胞,涂布于Cm 10 ug/ml抗性的LB平板,37 ℃恒温倒置培养至出现单克隆
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问
为什么细胞使用不同浓度的药物处理后,cck-8结果不理想?
不做科研趴菜
药物处理前关注细胞状态,分细胞时尽量密度均一
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问
论文写作范围请教
羽2BRD
可以写啊,相关的心理研究都行的。比如青少年犯罪与心理健康的相关性分析。
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问
cytoscape可以实现两组基因的KEGG/GO分析的对比吗,如果可以是怎么操作呢
loveliufudan
对于两组基因的KEGG/GO分析的对比,Cytoscape可以使用插件EnrichmentMap来实现。下面是大致的操作步骤:安装EnrichmentMap插件:在Cytoscape菜单栏中选择“Plugins”->“Manage Plugins”,在搜索框中输入“EnrichmentMap”,找到该插件并点击“Install”。导入基因集数据:将两组基因的KEGG/GO分析结果导出为两个独
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问
求助!细胞污染
dunima
大多数细菌对紫外还是很敏感的,所以影响不大,但除了台子消毒以外,环境最好也紫外照一下
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问
HE染色结果
土井挞克树
脱水有些过度了,已经丧失了正常的状态。
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问
miRNA的逆转录内参在10左右,目的miR测不出来,怎么搞
dxy_rt9z23i7
我也用的诺唯赞的这两个试剂盒,逆转引物用的诺唯赞他们的软件设计的。内参和目的miRNA的引物要分开两个管子逆转,不然的话会有误差。本来基因组里内参的表达量和你的目的miRNA的表达量是不一样的,内参逆转产物之后点Qpcr的时候是要稀释的,目的miRNA的表达量一般都比较低,不用稀释,我自己是这么做的,能做出来。
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