实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问3D培养类器官所需的48孔板是有专用的吗？

huarenqiang5

是的，3D培养类器官所需的48孔板有专用的。

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问血管平滑肌细胞表型转换时一定有PDGF改变吗

龙大人驾到

不一定。虽然PDGF、TGFb、VEGF、FGF等因子是常见的调节因子，可以诱导血管平滑肌细胞的表型转换，但并不意味着这些因子是唯一的调节因子。如果平滑肌细胞通过别的因子导致了表型转换，这些调节因子未必会发生改变。此外，血管平滑肌细胞表型转换是一个复杂的过程，可能涉及多个信号通路和调节因子的相互作用，因此需要具体情况具体分析。

3 回答390 围观

问请问这个破骨细胞诱导成功了吗？

sswei

诱导成功的破骨细胞为可见单个核细胞融合成多核细胞，TRAP染色可见多数细胞胞浆呈酒红色。因该镜下呈酒红色胞浆的细胞数太少，所以诱导欠成功。

3 回答390 围观

问同一条基因，一样的引物、模板、酶，在同一台pcr仪跑，但是结果如图，之前跑的比较好，今天跑的就很差强人意。

weiran0928

第二天跑的胶图下方引物二聚体明显增多，可能是引物出现了污染或降解，建议更换新的引物，可以用送的引物干粉，加入一定量dd H2O重悬即可，引物管上有说明的。

4 回答334 围观

问蛋白互作-免疫共沉淀

sswei

蛋白质-蛋白质相互作用是指两个或两个以上的蛋白质分子通过非共价键形成蛋白质复合体的过程。蛋白质与蛋白质之间的相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分，对调控细胞及其信号有重要意义。蛋白质互作研究按照实验目的可分为两大类，一是验证两个蛋白是否存在相互作用，二是筛选某个兴趣蛋白的互作蛋白。据此是可以通过共价键形成ABC蛋白。

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问LPS诱导上皮细胞炎症

龙大人驾到

关于第一个问题，炎症并非只有肿瘤细胞才会发生迁移，一些炎症细胞也可以通过迁移到达炎症部位并发挥作用。此外，炎症过程中细胞增殖和迁移都可能发生改变，因此同时检测细胞增殖和迁移可以更全面地了解炎症过程对细胞的影响。至于为什么没有做凋亡数据，可能是因为凋亡和增殖、迁移不同，需要更复杂的实验设计和分析方法，而且炎症本身就已经是一个复杂的过程，可能没有必要同时考虑所有方面。关于第二个问题，MAPK通路和防御

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问如何准确确定菌株里有没有某个基因

balalaLy

或许摇个菌液送测序最简单快捷了，

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问求助大鼠心力衰竭模型

龙大人驾到

大鼠给予异丙肾上腺素后发生死亡的可能原因有很多，以下是一些可能的因素：1. 给药方法不当：异丙肾上腺素的给药方法和剂量应该根据实验需要和动物体重进行调整。一般来说，异丙肾上腺素的给药可以通过静脉注射、皮下注射等方式进行。此外，给药前应该进行适当的麻醉和镇静，避免动物产生压力反应导致死亡。2. 异丙肾上腺素浓度过高：如果异丙肾上腺素的浓度过高，会导致血压升高、心跳加快等反应，严重时可能导致心律失常、

4 回答343 围观

问做sdspage的时候上层蛋白质条带总是会消失，有没有大神能帮忙看一下会是什么原因导致

土井挞克树

我之前也经常出现锯齿，后来发现是蛋白降解了，你可以跑个电泳验证一下

3 回答263 围观

问硫酸铵沉淀

weiran0928

看样子可能是盐浓度过高导致的。这里的80%是指饱和硫酸铵的80%浓度吗，也就是终浓度3.2M？这个浓度是比较高的，建议做个硫酸铵沉淀的浓度梯度，用更小的浓度沉淀更好。一般来说，50%以上差不多就够了。要么就减少上样量。

3 回答671 围观

问ZIF8负载核酸

sswei

可能提取质粒的过程中混入了染色体进去。

3 回答437 围观

问Hek-293细胞求助

相似又互补

你这个很大程度是细胞培养的环境变差了，你可以打扫一下细胞间，清理一下培养箱。

4 回答567 围观

问碧云天的茜

土井挞克树

c0148是专门检测成骨细胞的，c0138检测干细胞显色好

3 回答270 围观

问胞膜GABA受体染色

龙大人驾到

要观察GABA受体在胞浆和胞膜的分布，可以尝试以下几种实验设计：1. 免疫荧光染色：使用特异性的抗体标记GABA受体，在细胞水平下观察GABA受体在胞浆和胞膜的分布情况。可以使用荧光探针或荧光标记的抗体等方法进行检测。通过共聚焦显微镜等技术观察荧光信号的分布情况。2. 膜蛋白分离：使用细胞膜蛋白分离试剂盒等方法，将胞膜和胞浆分离。然后使用Western blot或免疫印迹等技术检测GABA受体在胞

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问求助：小鼠MCAO模型

土井挞克树

1.选用柔韧度合适的线栓2.选择线栓型号要与老鼠体重相配。每个地区的老鼠有差异，所以要做预实验，根据预实验结果来选择合适型号线栓。3.插破的情况下，也可以根据插破点来找到合适型号线栓。

3 回答447 围观

问Transwell小室侵袭与共培养问题

土井挞克树

可以共同培养，自己收的细胞要放在上室。

3 回答1520 围观

问如何检测标本中某基因或蛋白的含量

土井挞克树

可以做rt-pcr，来检测rna的含量。然后做qpcr来定量分析rna

3 回答309 围观

问观察拟南芥的表型，其中要求计算拟南芥的萌发率，那在一天的什么时候数拟南芥的萌发数最好呢，还是一天多数几次，分早中晚

sswei

拟南芥在发芽过程中，它要求合适的温度（22-23℃）、光照、光周期、湿度。并且要求打破休眠。上述影响因素中，光照和湿度是2个必需的条件。在种子发芽的过程中，如果种子被土壤遮盖而不能见到阳光则种子不能发芽。所以，在计萌发数时宜白天为佳，每天白天固定时间数3次。

3 回答917 围观

问RAW264.7用LPS造模，时而成功时而失败，找不到原因，细胞都没有问题，大家都是怎么操作的呀

dxy_7wd5i4x0

1.lps质量问题，看有没有过期？2.浓度梯度摸索，以及孵育的时长，像我目前孵育浓度最高1.5微克每毫升，孵育时长最高24h3.比较重要的一点，因为lps刺激raw264.7促进细胞极化，所以细胞培养过程中我选择不用胰酶消化，直接预冷pbs浸泡，细胞刮刀去刮落细胞传代

5 回答7432 围观

问chamot的RANKL,100ng/ml,100×，TRAP染色后就这样，不知道有没有成功呀？

dxy_b0h9si93

检测一下染料配制时是不是溶解不充分

3 回答440 围观

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