实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问hepg2细胞做迁移实验transwell穿不过去

loveliufudan

在您的实验中，由于细胞大小超过了孔径大小，这可能是导致细胞无法穿过半透膜的原因之一。为了确定是否是孔径大小的问题，您可以尝试使用具有更大孔径的Transwell小室进行实验。您还可以尝试使用其他细胞类型，看看它们是否可以穿过半透膜，以确认实验方法是否正确。另外，您需要确保在实验过程中使用适当的实验条件，例如适当的培养基、细胞密度和处理时间。如果有必要，您可以尝试优化实验条件，以提高细胞迁移的效率。

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问DIO染料标记细胞膜

土井挞克树

把荧光材料用抗体孵育然后和细胞膜结合

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问痤疮丙酸杆菌

土井挞克树

痤疮丙酸杆菌在液体培养基中的照片如图

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问aSMA抗体为什么染进核了？求助求助！

loveliufudan

如果您的aSMA染色显示出了细胞核的颜色，可能会有以下几种可能性：实验操作失误。例如，未完全去除细胞外的aSMA抗体，或者使用了与aSMA抗体交叉反应的抗体。染色效果异常。可能是染色试剂批次变异，或者是染色温度、时间等实验条件不恰当。样本细胞异质性。不同的细胞类型在染色效果上可能会存在差异，可能会导致aSMA染色在细胞核中出现颜色。

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问有核红细胞裂解液

土井挞克树

一般有核红细胞需要等成熟后再进行裂解。选择常规的红细胞裂解液就可以

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问R语言用psm构建完nomogram后画校准曲线时报错

loveliufudan

根据您提供的代码，您可能是因为没有正确调用survest.psm()函数，导致在进行预测生存曲线时出现了错误。可以尝试以下更改代码：#nomogram构建rm(list=Is())library (Hmisc)library (grid)library(lattice)library (Formula)library (ggplot2)library(rms)library (survival)l

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问confocal封片不平导致细胞不在同一个平面上，无法聚焦是什么原因导致的？

土井挞克树

可能的原因有1.标本凹凸不平2.标本消化不足3.封片不平

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问细胞分选

土井挞克树

可以用流式实验做GABA分选，注意做好分选标签。

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问雪旺细胞

土井挞克树

分离：通过常规的热酶消化法、组织块法以及冷酶消化对雪旺细胞进行分离培养：雪旺细胞培养通过双差速贴壁和有丝分裂抑制剂阿糖胞苷(Ara-C),去除或抑制成纤维细胞生长,通过成纤维细胞生长因子(bFGF)使雪旺细胞得到进一步增殖.

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问细胞成团，细胞出芽实验！！

土井挞克树

我的做法是离心１０００ｒｐｍ，五分钟，过程尽量避免摇动离心筒，如果细胞少的话，可留少许上清，基本不会丢失细胞．如果是吸走培养液的话，再加新的，就等于传代了

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问怎样让给药后的细胞恢复状态

loveliufudan

在您的实验中，给细胞低浓度的顺铂处理24小时后撤药，但细胞不能恢复之前的状态，这可能是由于顺铂引起的细胞毒性过大，细胞无法恢复。要让细胞恢复状态，您可以尝试以下方法：适当降低顺铂的浓度：如果细胞对顺铂的毒性过大，可以尝试适当降低顺铂的浓度，或者缩短处理时间，以减少对细胞的影响。加入细胞生长因子：细胞生长因子可以促进细胞生长和分裂，有助于加速细胞恢复。您可以根据实验需求选择适当的细胞生长因子加入到培

4 回答559 围观

问求助！！！！！

loveliufudan

在运行PmTOR Western blot实验时，常用的marker有常规的蛋白质分子量标准品（如Rainbow™ 磷酸化标准品或PageRuler™ Prestained Protein Ladder等），以及PmTOR的两个磷酸化位点Ser2448和Ser2481。这些marker可以用来确定PmTOR蛋白在Western blot上的位置，并且可以用来验证实验条件是否正确。同时，还可以使用总

1 回答183 围观

问提取的大肠杆菌rna ，图1图2最上面条带是啥，很费解。

土井挞克树

可能是大肠杆菌裂解后的16S，23S。

2 回答589 围观

问病毒刺激导致基因表达降低原因？

土井挞克树

板中存活的RNA也是会有降解的，病毒刺激后会改变转录，导致表达降低

4 回答643 围观

问培养基中添加维生素的浓度

土井挞克树

根据不同的培养基以及培养物的不同，维生素的添加也不同

3 回答673 围观

问请问冻干粉末蛋白复溶之后用什么液体进一步稀释？

土井挞克树

冻干粉末可以用pbs来进行稀释。

3 回答1225 围观

问请问SpliceAI中的那个-A参数怎么通过自己的gtf文件得到

土井挞克树

-A参数是开始修改的元素索引位置。在gtf中可以查看到

3 回答494 围观

问Tran screener CD73实验，最后的结果怎么处理呀

土井挞克树

得到CD73分泌的阳性结果后，可以做荧光染色定位，查看定位情况。

2 回答254 围观

问提取植物内生菌DNA

土井挞克树

可以直接用提取后再分离纯化，也可先分离纯化然后再提取

4 回答764 围观

问LpS诱导细胞炎症，LPS效果不太明显

Eason老歌迷

我开始用LPS处理也是没有炎症，后来逐渐加长饥饿处理的时间，效果就变得明显了。

3 回答3966 围观

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