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实验问答

31,476,782 科研人在看

问请问生信分析是选GO&Kegg还是GSEA？

loveliufudan

选择何种生物信息学分析方法需要根据实验设计和分析目的来决定。对于基因表达谱芯片数据的分析，可以采用GO&KEGG和GSEA等方法，以探究差异表达基因的生物学功能和通路。以下是一些参考建议：如果你感兴趣的是差异表达基因的生物学功能和通路，那么GO&KEGG分析可以是一个好的选择。你可以使用一些生物信息学工具，如DAVID、Enrichr等，对差异表达基因进行功能注释和通路富集分析。这

2 回答1174 围观

问Uuo模型的假手术组是在假手术后1天处死还是第14天？

土井挞克树

Uuo模型的假手术组是在假手术后14天和28天处死

2 回答930 围观

问请问眼眶取血后出现鼻孔出血，老鼠误吸是什致死，是手法不对?位置扎太深了吗?

loveliufudan

鼻孔出血可能是因为手法不当或者位置扎得太深引起的。在进行眼眶取血时，应该选择合适的针头和注射器，并仔细选择取血位置。取血时需要使用适当的力度，以避免损伤周围的组织，同时确保可以顺利获取所需的血液样品。如果手法不当，针头过深穿透鼻腔后可能会刺激到鼻黏膜，导致鼻孔出血。此外，取血时应该避免扭动针头，以免造成血管和组织的损伤。误吸也可能是导致小鼠死亡的原因之一。在进行任何类型的小鼠操作时，都应该使用正确

3 回答626 围观

问做重组蛋白，构建质粒（无his-tag）

sswei

通过设计引物，添加his-tag，克隆到质粒中去。

3 回答1310 围观

问载体双酶切胶回收后能在-20摄氏度保存多久呢

loveliufudan

双酶切胶回收后的DNA样品可以在-20摄氏度长期保存，通常可保存6个月至1年。存储时需要注意以下几点：使用无菌的冷冻保存管保存样品，并确保样品在保存管中完全干燥。在保存之前，检查样品的纯度和浓度，以确保其符合您的实验要求。避免反复冻融样品，因为这会降低DNA的质量和纯度。在保存过程中定期检查样品的质量和纯度，以确保样品适用于后续实验。需要注意的是，对于一些敏感的DNA样品，如RNA或者低浓度的DN

4 回答7616 围观

问请问长链饱和脂肪酸给小鼠灌胃用什么溶剂溶解

loveliufudan

长链饱和脂肪酸可以选择在灌胃过程中与溶剂混合，以提高其溶解度和生物利用率。一般可以使用一些有机溶剂来溶解长链饱和脂肪酸，如氯仿、甲醇、乙醇、二甲亚砜等。在选择溶剂时，需要注意该溶剂对小鼠的毒性和耐受性。以氯仿为例，可以使用以下步骤将长链饱和脂肪酸与溶剂混合：将适量的氯仿加入容器中，并在磁力搅拌器上搅拌。逐渐加入所需的长链饱和脂肪酸，并不断搅拌，直到完全溶解。将混合溶液放置一段时间，直至完全均匀。使

3 回答1775 围观

问H&E染色的图片该怎么看？

sswei

细胞损伤分为可逆性改变与不可逆性改变两类。1、可逆性改变包括：细胞水肿、脂肪变、玻璃样变、黏液样变、病理性色素沉着；2、不可逆性改变即坏死，其基本病变为：核固缩、核碎裂、核溶解。据此，该图不能完全判断为细胞损伤，理解错误。

3 回答5765 围观

问大鼠盆神经

loveliufudan

在解剖上，大鼠盆腔神经位于大腿内侧和尾部附近的盆腔区域。具体来说，可以在大腿内侧股沟的上方或者在尾部底部找到盆腔神经。

3 回答1639 围观

问小鼠肺组织

sswei

胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。胶原酶的使用浓度一般为0.1- 5mg/ml，消化过程中可以搅拌以促进酶的消化。胶原酶在消化的过程中可以引起细胞的少量死亡，一般消化时间为15min至数小时。如果浓度发生变化那么消化时间可能更长。消化过程中首选的缓冲液为含钙离子和BSA的Krebs Ringer Buffer。在消化的过程中如果细胞大量死亡则需要降低酶

3 回答2127 围观

问伊红染色测定精子畸形率中的去组织碎片是什么意思？

loveliufudan

在伊红染色前，需要将附睾组织去除，只留下精子。这个过程中，有可能会有组织碎片残留在精子混悬液中。这些组织碎片会影响对精子形态的观察和计数。因此，在用明移液枪吹打精子混悬液时，可以轻轻吹打，以去除残留的组织碎片，这就是所谓的去组织碎片。

3 回答528 围观

问求助关于Jurkat细胞的问题。

sswei

Jurkat细胞如果用慢病毒做成car-t，不具有永生能力。如果用慢病毒转染，转染前可使用CD3/CD28抗体进行激活。慢病毒转染后，可以对肿瘤细胞进行杀伤，CD4比CD8的杀伤作用差些。

3 回答2731 围观

问标准偏差

sswei

N指调查统计中的样本总数。n指调查统计中的样本个数。

3 回答732 围观

问提取甘油菌质粒的时候，用错了培养基有何影响

loveliufudan

使用LB培养基提取甘油菌质粒相对于使用2xYT培养基，可能会对质粒数量和质量产生一定的影响，但具体影响的大小会受到多种因素的影响，如培养时间、培养温度、细胞密度等等。一般来说，2xYT培养基比LB培养基营养更丰富，支持细胞生长和代谢的能力更强，因此使用2xYT培养基培养甘油菌会产生更多的细胞和质粒，且质粒更加稳定，得到的质量也相对更高。而使用LB培养基可能会导致细胞生长缓慢，产量较低，质粒含量和质

3 回答523 围观

问求助‖真菌鉴定，除了ITS还可以用什么呢

sswei

真菌检查的方法包括直接镜检、真菌培养、血清学试验、组织病理检查等，最常用的就是真菌的直接镜检。真菌的直接镜检需要使用酒精清洁创面，可以收取表面的皮屑、毛发、甲板或者体液组织等。将收取的标本放在玻璃片上，加5%-10%的氢氧化钾液，盖上盖玻片，溶解一会儿，一般5分钟后可以在显微镜下低倍镜下寻找有无菌丝或者孢子，寻找到菌丝或者孢子后可以转为高倍镜进行观察。其他还有通过筛子检验，比重检验法，染色检验法，

3 回答922 围观

问请问EdU和Ki67做免疫荧光染色，怎么同时染

sswei

EDU是一种新型的非放射性同位素细胞增殖检测的方法，在细胞培养、实体组织及临床研究中得到了广泛的应用。该技术可用于细胞成像、流式、细胞示踪、DNA损伤修复检测、线粒体活性检测以及病毒增殖活性检测等，EdU亦适用于活体注射。与传统的免疫荧光染色检测方法相比，EdU检测法更简单、更快速、更准确，不需要严苛的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增

2 回答4966 围观

问请问哪位大神有肠道HE染色的protocol？🙏

loveliufudan

以下是一般肠道HE染色的protocol，供参考：材料：1.肠道组织切片2.1%硫酸铁溶液3.0.5%氯化钡溶液4.酒精：70%、90%、95%和100%5.苏木精染色液6.伊红染色液7.脱水剂：丙酮和xylene8.封片剂步骤：1.将切片放入1%硫酸铁溶液中，浸泡5分钟，去除多余的溶液。2.将切片放入0.5%氯化钡溶液中，浸泡2-3分钟，去除多余的溶液。3.将切片置于70%乙醇中，浸泡5分钟，然

3 回答859 围观

问GPCR抗体药物的blocking实验

sswei

流式细胞术检测比放射性元素检查的灵敏度差，准确性低。

3 回答1270 围观

问A549 划痕实验

墨幽染染

划痕实验很重要的一个因素就是铺板量，不同细胞的大小不一样，铺板量不一样。就像786-O细胞比较大，96孔板一般铺2-3万细胞/每孔，第二天细胞融合度达到90%以上；而RKO细胞比较小，96孔板一般需要铺7-8万/每孔，第二天细胞融合度差不多达到90%左右。所以具体要根据细胞大小适当调整，细胞划痕铺板密度一般为70-90%之间。密度过低，增殖因素可能会影响迁移能力，反之，对于细胞状态会有影响，以至于

3 回答1438 围观

问卡方检验结果提示是常量，无法计算统计量，这种应该如何描述卡方值和P值？

sswei

对于这种情况，一是改变变量，如非双改其它或加大样本量，二是更改统计方法，改Fisher精确概率法。

3 回答2619 围观

问QTL在染色体上的定位图

sswei

按照图例，外区间在1.3一18.6，内区间在7.9一12.3。

3 回答1718 围观

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