• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        竞争法胶体金,不消线

        相关实验:免疫胶体金技术

        user-title

        待字闺中85

        测铅胶体金竞争法,T线抗原画线浓度为0.5mg/ml(之前划1mg/ml),1μl/cm,T线一直很淡,本来想加浓度,抗体厂家客服说,划线太多消不掉。目前的问题是,T线很淡,要做成10ppb消线,目前只能做到500ppb消线。如果再减少划线抗原的量,阴性样本出线都不明显了。尝试过包被液1%nacl+1%吐温-20+0.5%海藻糖+1%-5%BSA,tris 9.0,BSA多了线就更不明显了。目前用的是万分之一胶体金。10μl/cm喷涂。希望大神帮助。

        wx-share
        分享

        2 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        不消线可能是因为过量的蛋白可能会封闭某些结合位点,建议换用其他的封闭方式,作对比试验

        user-title

        待字闺中85user-title

        胶体金包被过程中采用终浓度1%的bsa封闭,后来考虑到这点,换成0.5%和0.25%,发现没有什么变化,结合依然很弱。划线现在是水稀释。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        针对您的问题,我有以下几点建议:

        调整抗原浓度

        首先,您可以尝试调整抗原浓度,以增加T线的强度。根据您提供的信息,T线抗原的面线浓度为0.5mg/ml,您之前曾尝试过1mg/ml的浓度,但效果不佳。您可以考虑在0.5mg/ml和1mg/ml之间进行浓度的微调,以寻找最佳的浓度条件。此外,您还可以考虑尝试使用不同的抗原来源或不同批次的抗原,以查看是否会对T线强度产生影响。

        调整胶体金浓度和喷涂量

        其次,您可以尝试调整胶体金浓度和喷涂量。根据您提供的信息,您目前使用的是万分之一胶体金,喷涂量为10ul/cm。您可以考虑增加胶体金浓度或喷涂量,以增加线的强度。当然,您也需要注意不要过度增加浓度或喷涂量,以避免引起背景噪音。

        尝试其他增强信号的方法

        最后,如果以上方法无法改善T线的强度,您可以尝试其他增强信号的方法,例如:

        尝试其他标记物,例如辣根过氧化物酶(HRP)等。

        考虑对抗体进行亲和纯化,以提高其特异性和亲和力。

        考虑对样品进行前处理,例如浓缩或分离纯化,以提高其敏感性和特异性。

        希望这些建议能够对您有所帮助,祝您实验顺利!

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序