实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问成骨诱导救救孩子吧

loveliufudan

没有染色前的钙化结节可能难以观察到，因为钙化通常是细胞死亡或坏死的结果，会在钙离子等离子体中沉积形成。在组织切片或细胞培养中，未染色的钙化结节通常呈现为无色或白色颗粒或斑点，大小和形状不一。如果您在组织切片或细胞培养中观察到了这些颗粒或斑点，可以结合组织形态学和细胞学特征，如细胞形态、细胞核大小和形态等，来判断它们是钙化结节还是其他类型的结构，如死细胞团块。同时，钙化结节通常需要通过特殊的染色方法

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问鲤鱼上皮细胞形态不对劲长得很慢

橙汁儿青柠味

可能有支原体污染，导致状态不好，很多死细胞和细胞碎片

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问hela平板克隆和培养

loveliufudan

有几个可能的原因导致hela细胞在平板克隆时不抱团生长，然后出现死细胞和散开的情况：细胞密度过低：平板克隆需要适当密度的细胞才能形成克隆，如果密度过低，细胞就会散开生长，导致克隆无法形成。细胞寿命过长：HeLa细胞在长期培养中会逐渐失去抱团生长的特性，细胞的寿命也会逐渐延长，这可能导致细胞的死亡率增加。培养基组分不足：平板克隆需要充足的营养和生长因子，如果培养基组分不足，细胞就会死亡或生长缓慢，无

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问【求助】原代神经元第五天开始大量死亡

橙汁儿青柠味

细胞状态不好，并且出现一些黑点可能是有支原体污染

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问克隆形成实验可以用T25的培养瓶嘛

橙汁儿青柠味

不建议用培养瓶，常用是6孔板，这样几种不同分组的还能方便对比。

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问求助！钙成像实验

loveliufudan

1.给细胞灌注不同的溶液通常可以使用温和的灌流系统，例如可以使用微注射泵和针头将溶液缓慢地灌入特定位置。这种方法需要特殊的仪器和技术，需要较高的实验技能。2.直接用板子多做几个孔对应加不同的溶液去拍荧光是可行的。这种方法比较简单，但需要注意的是，在加入不同的溶液之前，要将细胞平稳地定位在视野中。3.钙成像实验通常可以使用专门的软件来分析数据并生成峰值图。这些软件通常可以根据时间序列数据计算出钙离子

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问关于IFN-γ和TNF-α诱导特应性皮炎炎症细胞模型的问题。

土井挞克树

加入这两种物质是诱导凋亡的，所以你后续的浓度摸索是对的，可以采用后面的浓度梯度进行实验。

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问求助:sw620形态，这是细胞密度太大，长第二层了吗？

loveliufudan

这种情况下，建议将细胞密度适当降低，并尝试将细胞重新分散均匀，可以轻轻吹气或者振荡离心管使细胞均匀分散。关于细胞长第二层和细胞融合的区别，细胞长第二层是指在细胞培养皿上，细胞在原有的一层基础上增生，形成的新的一层细胞。而细胞融合是指不同的细胞融合在一起形成的大细胞。通常，在细胞培养的过程中，不同的细胞类型不会发生自发的融合现象。如果您是从细胞库中购买的SW620细胞，那么这种情况下应该是聚集的情况

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问使用PLA检测蛋白质互作时需要对细胞进行通透处理吗？

此用户已注销

经过 4% 多聚甲醛固定后，可以使用0.2% TritonX-100透化。

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问小鼠子宫内膜基质细胞原代提取

土井挞克树

你细胞提取之后是否提纯了？提高提取后不提纯直接培养就会这样，把细胞提纯之后接种，保持培养基清洁就不会有这么多杂细胞了

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问研究动脉粥样硬化内皮细胞时，选哪种细胞比较好。除了人脐静脉细胞之外

loveliufudan

除了人脐静脉内皮细胞之外，可以考虑使用人肺微血管内皮细胞（HPMEC），人髂动脉内皮细胞（HIAEC）等来源的内皮细胞，这些细胞来源于人体内的不同器官，具有不同的特性和生理功能，适合用于研究不同疾病的发病机制。此外，还可以使用小鼠动脉内皮细胞（MAEC）等动物来源的内皮细胞作为模型，这些细胞来源于小鼠动脉组织，可用于研究动脉粥样硬化等相关疾病的发病机制。选择合适的内皮细胞需要考虑实验目的、研究对象

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问平板克隆实验求助

loveliufudan

根据您提供的情况，小尾巴可能是细胞在移动过程中留下的痕迹。一种可能的解释是，您在平板克隆或细胞克隆时，细胞密度太高，导致细胞无法自由移动，只能通过伸长的方式扩散到周围的空间。当细胞扩散到较远的位置时，就会留下一条痕迹，形成小尾巴。为了避免这种情况，您可以尝试减少铺板密度或在进行克隆时增加细胞数目，以便让细胞有足够的空间自由移动。此外，在换液时注意不要过度搅动细胞，以免对细胞造成不必要的压力。

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问小鼠原代神经元活细胞成像观察自噬体运动

橙汁儿青柠味

细胞转染后观察gfp-lc3，此时细胞分成两组，一组对照，另外一组饥饿诱导或者药物诱导，然后两组对比自噬情况。雷帕霉素药物诱导的效果会比饥饿诱导的效果好，建议先试一下

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问jc1染色线粒体为什么会这样

土井挞克树

感觉线粒体断裂了，是不是染色时间太长。

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问肝脏HE染色

土井挞克树

是脱水过度，减少固定时间，用醇类固定时间太长就会脱水。

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问请问动物实验中哪些抗氧化指标比较新？

loveliufudan

以下是一些比较新的指标：NRF2（核因子E2-相关因子2）：NRF2是一个关键的转录因子，能够促进细胞的抗氧化防御反应。在小鼠灌服实验中，可以通过检测NRF2水平来评估细胞抗氧化能力。HO-1（血红素氧合酶1）：HO-1是一个抗氧化酶，在细胞应激反应中起着重要的作用。HO-1的表达水平可以反映细胞的氧化应激状态。GPX4（谷胱甘肽过氧化物酶4）：GPX4是一种细胞内重要的抗氧化酶，能够清除细胞内的

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问请教一下普通WB做泛素化条带应该怎么设计实验呢

loveliufudan

如果您想检测p53的泛素化，可以将细胞或组织样品进行裂解，然后用p53抗体进行免疫共沉淀（IP），将泛素化的p53捕获下来，最后通过WB检测泛素化的产物。具体实验步骤如下：细胞或组织样品的裂解：将培养细胞或组织样品加入裂解缓冲液中，加入蛋白酶抑制剂，离心裂解液去除细胞碎片和细胞核。免疫共沉淀：将裂解液加入p53抗体预先吸附的蛋白A/G琼脂糖糖珠中，免疫共沉淀泛素化的p53蛋白。如果您的样品中p53

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问小鼠皮下胶冻样物质

loveliufudan

这种胶冻状物质可能是脂肪坏死组织，也称为坏死性脂肪炎。坏死性脂肪炎是一种常见的脂肪组织疾病，常见于肥胖和代谢性疾病患者，如糖尿病患者。在小鼠模型中，高脂饮食也可以引起坏死性脂肪炎。它通常是由于脂肪组织供血不足引起的，导致组织坏死和胶冻状物质的形成。

2 回答470 围观

问大佬们帮忙看看293T细胞？

dxy_vh4bdst5

我一般刚复苏，或者低密度复苏培养时候刚开始也是这样，加血清，接种密度高点，就会长的好

5 回答1071 围观

问氨茶碱用于细胞实验，买的规格是mg，最后作用于细胞需要终浓度大概10-5次方mol/L，这种需要怎么稀释呢？

认真搞科研的小王

先配置母液1mol/l或者0.1mol/l之后，可以以10倍梯度稀释，将母液稀释至想要的浓度。

3 回答458 围观

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