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问
SCI插图
土井挞克树
可以用3D visible body软件做
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问
细胞间隙有小点,请问是污染吗?
橙汁儿青柠味
大一点的应该 一些细胞碎片,可能是因为细胞消化吹打过度导致的
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问
划痕如何才能做到笔直且美观?
橙汁儿青柠味
拿着直尺卡在培养板上方,然后用移液枪插一个10ul的枪头,沿着直尺在孔板中划线
3 回答
673 围观
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问
细胞培养出现的未知小黑点究竟是什么,根本不像黑胶虫?
橙汁儿青柠味
有可能是支原体污染了,可以采用支原体去除剂
4 回答
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问
原代细胞分离,例如肠肠皮细胞,分离时间较久,怎么能保证细胞的活力?
橙汁儿青柠味
在冰浴的pbs中分离原代细胞,可以提高细胞存活率
1 回答
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问
细胞培养时由于没有原来使用的培养基如dmem,于是换成例如1640培养基,经常调换培养基会影响细胞吗?
橙汁儿青柠味
更换培养基容易影响细胞状态,每个培养基的成分不太一样,所以每个细胞的最适培养基不一样
6 回答
2053 围观
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问
贴壁细胞传代时,用到胰酶消化时,有少量胰酶存在是否会影响细胞状态?
橙汁儿青柠味
存在少量胰酶不影响细胞的,因为加入的培养基能够中和掉胰酶的作用
4 回答
964 围观
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问
细胞培养出现了许多细胞碎片该怎么办?如何避免?
橙汁儿青柠味
可以通过pbs多洗涤,消化离心去上清等从而去除细胞碎片,主要注意控制胰酶消化时间,防止过度吹打细胞
4 回答
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问
胰酶消化细胞时间怎么判断从而避免过久或不足?
橙汁儿青柠味
胰酶消化的时间以细胞变圆、轻拍细胞侧壁脱落为佳
4 回答
1928 围观
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问
3T3-l1细胞诱导分化以后进行油红O染色,着色太深,有的地方黑乎乎的一片怎么解决?
橙汁儿青柠味
可以用pbs多洗涤几遍,另外应注意细胞密度
3 回答
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问
做的3T3-l1细胞,复苏第八代,结果培养皿里面很多飘起,并且空泡化严重,请教大家是怎么回事?
橙汁儿青柠味
细胞内出现空泡多半是因为细胞老化或者消化过度导致
4 回答
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问
细胞悬液涂片可以进行免疫组化吗
loveliufudan
细胞悬液涂片可以进行免疫组化(IHC)检测。IHC是一种常用的细胞或组织检测方法,通过检测特定抗原的免疫反应性,来定位和鉴定细胞或组织中特定的蛋白质表达和定量水平。在细胞悬液涂片进行IHC时,需要先将细胞涂在载玻片上,然后进行固定、透明化、抗原修复、抗体染色等操作步骤。不同于组织切片,细胞悬液涂片的特点是细胞形态和结构比较单一,对于特定蛋白的定位,需要选择合适的抗体,并根据抗体的性能,针对具体的免
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问
琼脂糖凝胶电泳
橙汁儿青柠味
主要是引物设计的不够特异,所以pcr出来很多非特异性的条带。可以在设计好引物后,在ncbi上面blast验证一下
4 回答
1210 围观
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问
请问怎么从细胞培养基中提取分泌蛋白呢?
橙汁儿青柠味
分泌蛋白存在于培养基中,首先可以减少培养基,从而增加蛋白浓度,如果蛋白量还是不够,可以将蛋白用真空干燥机进行浓缩冻干,然后再进行适当溶解即可。
2 回答
5584 围观
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问
为什么?小鼠皮肤组织蛋白
橙汁儿青柠味
首先确定蛋白浓度以及上样量足够,其次确定抗体种属正确。
1 回答
637 围观
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问
求助,这种情况是不是污染了,如果污染这个是什么菌啊?怎么避免?
dxy_bz3louvw
可能是细胞消化的时候有一些没有吹散,导致细胞有几小团聚堆的,看图片感觉没有污染,如果长菌的话培养基会变混浊的,也可以自己判断一下。
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问
u87细胞培养问题求助?
是TTT
听你的描述很可能是黑胶虫污染,可以买黑胶虫去除剂试试
10 回答
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问
敲降某甲基化转移酶以后,wb显示组蛋白H3K27me3和H3K4me3的水平不发生变化,请问是需要对细胞做什么处理再跑wb吗?
是TTT
你用的抗体是什么抗体呢,单甲基化抗体?
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问
贴壁细胞mkn45消化用37度两分钟总是消化不下来,每次都要搞很久,细胞状态就不好了,该怎么办呢
是TTT
可以在显微镜下观察,细胞变成圆形,就可以加培基终止消化,并且吹打下来了,这种方法比较科学
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问
用药物阻断H226细胞中的YAP - TEAD通路后,通过IP实验提取出YAP和TEAD蛋白
是TTT
药物阻断前呢,这两个蛋白分子量在不同的位置吗?如果胶的配方,电泳等都一致的话,这两个分子阻断前后分子量不一样,可能是药物对他们发生了修饰左右,例如糖基化等等,可能会影响分子量
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