• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        FACS实验:求大神帮忙找下原因。

        user-title

        小小白在哦

        细胞:jimt1细胞(含A高表达,B高表达)抗体:A,B,以及含A,B的双抗C。目前做jimt1与A,B,C的结合,发现在FITC-count图中,A出现双峰,其中高峰占比为65%,B与C无此现象。为分析出现双峰原因以及去掉双峰,初步怀疑是JIMT1细胞中有部分低表达的细胞,将JIMT1做了亚克隆后,将这些亚克隆细胞(共8个,养了一个月)与A再次做了结合检测,未出现双峰,同时用JIMT1细胞与A结合作为对照,结果是亚克隆细胞与A结合的峰值都小于JIMT1与A结合的峰值,但按照65%的概率来讲应该比对照组有高有低,请教一下是什么原因呢,是我进行的方向错了吗?(排除A含量不足的情况,后来做了一次JIMT1细胞数量减半A不变的,结果还是高峰占比65%)

        wx-share
        分享

        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        这种双峰的现象可能有多种原因,但根据你的实验结果,可能性比较大的是在JIMT1细胞中存在不同表达水平的细胞。你的亚克隆实验似乎支持了这个假设,即使用亚克隆细胞的结合峰值都小于JIMT1与A结合的峰值,但这并不排除存在表达水平不同的细胞群的可能。可以考虑将细胞分选或者单细胞测序,以进一步探究这种双峰现象的原因。另外,如果实验设计和处理操作存在问题也有可能导致这种双峰现象,需要仔细排查。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        在二者共存的时候(J细胞和亚群)出现双峰是合理的,分别测由于体系中只有一种细胞而不出现双峰,你把J细胞提纯后再做就可以避免双峰

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序