海分枝杆菌基因敲除求助

未显色的原因可能是因为你的菌落数目不合适，导致转化效率低。因为每一种菌它的对数生长期对应的OD值是不一样的，在做之前要查清楚，只有处于对数生长期的菌做出的感受态转化效率才高。

可能存在以下问题：

质粒转化效率不够高：您可以尝试优化电转条件，比如改变电压、时间、质粒浓度等因素，提高转化效率。

质粒没有成功复制到海分枝杆菌细胞中：您可以通过PCR、测序等方法验证是否成功转化并复制到细胞中。

质粒中的基因敲除片段没有被正确插入到海分枝杆菌基因组中：您可以使用PCR、测序等方法验证基因敲除是否成功，或者考虑使用其他敲除策略。

海分枝杆菌中可能存在其他β-galactosidase酶或其他因素影响染色体插入物的表达或功能，您可以通过文献调研或实验验证这些因素是否存在。