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实验问答

23,129,381 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问人类染色体g显带标本制备与g带染色体识别中胰酶消化时间不足或过度会怎样？

loveliufudan

在人类染色体g显带标本制备和g带染色体识别中，中胰酶消化时间不足或过度会对结果产生不良影响。如果消化时间不足，未能充分消化染色体中的蛋白质和核酸，导致染色体上的结构和带型不明显或不清晰，从而影响染色体的识别和鉴定。此外，未消化完全的蛋白质和核酸会附着在染色体上，形成噪音和干扰信号，进一步干扰染色体的观察和分析。如果消化时间过度，会导致染色体的结构和带型严重受损，从而无法进行准确的识别和鉴定。过度消

2 回答1422 围观

问肝脏HE染色，想问一下这个密密麻麻红色的是什么？

土井挞克树

看着像是肝血管瘤组织。可以检查一下切片标本

1 回答426 围观

问H520鳞癌细胞株做小鼠成瘤实验反复失败，其他细胞株都可以，大家有没有遇到过？

loveliufudan

如果其他细胞株都可以的话，那么你就要考虑是否使用与H520鳞癌细胞株兼容的小鼠品系，是否存在免疫排异反应？

3 回答237 围观

问抗原抗体需要在超净台里面分装吗？

sswei

抗原抗体分装要求无菌条件下，所以需要在超净台里工作。

3 回答830 围观

问细胞培养液中蛋白富集方法

loveliufudan

分泌型蛋白的富集和沉淀方法有很多种，具体选择要根据您的实验需求和目标蛋白的特性来确定。以下是一种通用的筛选和富集分泌型蛋白的方法，供您参考：收集细胞培养液：当细胞生长至合适的密度时，收集培养液。您可能需要在收集前移除浮游细胞或细胞碎片。为此，可以将培养液通过低速离心（例如1,000-2,000 xg，10分钟）来实现。培养液的过滤：为了去除残留的细胞和细胞碎片，可以将收集的培养液通过0.22或0.

1 回答791 围观

问单细胞转录测序问题求助？

loveliufudan

单细胞转录组测序需要高质量的细胞核悬液才能得到可靠的结果。以下是一些具体要求和质控步骤：细胞核悬液的纯度要高：细胞核悬液中含有其他细胞成分或杂质会影响转录组测序的准确性。因此，在准备细胞核悬液时，应当尽量避免携带细胞质等其他成分。细胞核悬液的完整性要好：细胞核悬液的完整性对于单细胞转录组测序来说非常重要。破损的细胞核会导致RNA的降解，从而影响测序结果的准确性。因此，在准备细胞核悬液时，应当尽量避

2 回答421 围观

问分类变量怎么做NRI和IDI啊？

loveliufudan

对于分类变量，NRI可以通过以下步骤进行计算：对于每个观测值，计算在新模型中分类正确的概率和在旧模型中分类正确的概率；将观测值根据其预测的分类风险重新分类；比较两个模型中的观测值重新分类后的分布，计算出相应的NRI。对于分类变量，IDI可以通过以下步骤进行计算：构建一个决策树模型，并将分类变量加入模型中；比较分类变量存在和不存在时，模型的准确性差异；计算IDI。

2 回答594 围观

问蛋白表达咨询

loveliufudan

可能的原因有很多。可能是DNA转化效率不稳定，或者蛋白表达和折叠过程中存在问题，也可能是您的操作问题。以下是一些可能的原因和解决方案：1.转化效率不稳定：在您的实验中，37摄氏度生长可能会影响BL21(DE3)的转化效率。转化后，应该在室温下快速混合细胞和LB培养基，恢复期一般为1-2小时。然后将细胞在LB/ampicillin板上培养过夜。您可以考虑增加培养时间，以获得更好的转化效率。2.蛋白表

2 回答844 围观

问海分枝杆菌基因敲除求助

loveliufudan

可能存在以下问题：质粒转化效率不够高：您可以尝试优化电转条件，比如改变电压、时间、质粒浓度等因素，提高转化效率。质粒没有成功复制到海分枝杆菌细胞中：您可以通过PCR、测序等方法验证是否成功转化并复制到细胞中。质粒中的基因敲除片段没有被正确插入到海分枝杆菌基因组中：您可以使用PCR、测序等方法验证基因敲除是否成功，或者考虑使用其他敲除策略。海分枝杆菌中可能存在其他β-galactosidase酶或其

2 回答455 围观

问B6小鼠MPTP腹腔注射 30mg/kg7天，行为学不明显，考虑什么原因?

土井挞克树

行为学表现不明显的话，可以提高注射量到40mg/kg，然后再观察三天。

1 回答505 围观

问我的mkn45和28，从公司买的，同时复苏的，用的1640和培养瓶都是一批，但是45长了黑色点点看起来是黑胶虫，28一点问题都没，

橙汁儿青柠味

应是公司冻存的时候就有点问题，因为是一起复苏的，还用的一样的培养基

2 回答303 围观

问【求助】ELISA检测STC-1细胞上清中激素实验问题

loveliufudan

ELISA检测吸光度过低可能有多种原因，其中包括蛋白质降解、稀释过高、实验操作不当等。考虑到您检测的是细胞上清中GLP-1、CCK、PYY等蛋白质，蛋白质降解可能是一个可能的原因。如果您怀疑蛋白质降解可能影响ELISA检测结果，可以考虑加入蛋白酶抑制剂来保护蛋白质。蛋白酶抑制剂可以避免蛋白质在细胞上清中被降解，提高样品中蛋白质的浓度和稳定性。另外，您也可以考虑调整实验条件，如缩短采样时间、降低稀释

3 回答449 围观

问细胞污染求助！

简简单单的8872

可以添加一张细胞污染的图片，以供分辨

3 回答239 围观

问THP-1细胞长的咋样，不知道有问题没，刚开始养，还请懂得大牛给指导一下

sswei

THP-1细胞培养生长尚可，可以每隔3-4天加一些新鲜的培养基，或直接传代。

3 回答503 围观

问RNA提取试剂盒提取FLS细胞RNA浓度好低啊…

loveliufudan

RNA浓度仅50ng/ml是比较低的，可能是提取过程中出现了一些问题，例如细胞裂解不彻底、RNA沉淀不完整等等。如果使用RNA提取试剂盒时出现这种情况，可以尝试以下方法：细胞裂解：使用更彻底的方法裂解细胞，例如用高压细胞破碎器或液氮快速冻存再破碎等。提取过程中注意力度：注意所有步骤的细节，尤其是沉淀时离心时间和转速，可以增加离心时间或者提高离心转速，使得沉淀更完整。使用其他方法：如果使用RNA提取

4 回答725 围观

问求助，transwell迁移实验看不到细胞形态

sswei

颜色过深由于细胞衰老细胞核固缩，因为被污染了。

2 回答740 围观

问求问大鼠三叉神经尾核如何解剖，万分感谢

loveliufudan

1.确定解剖位置和方向：首先需要将大鼠固定在解剖台上，确定解剖位置和方向。可以使用头套或头架固定大鼠的头部，并通过显微镜或放大镜来观察解剖部位。2.切开皮肤和软组织：用手术刀在大鼠头部的枕骨后方开一个直径约1.5厘米的切口，将皮肤和皮下组织剥离，露出颅骨表面。然后用针头小心地将软组织分开，露出颅骨。3.钻孔穿过颅骨：使用高速钻床或其他骨科手术器械，在颅骨后方钻一个直径约1毫米的开口，直到穿过颅骨并

2 回答1595 围观

问高脂喂养SD大鼠鼻周有血

蓝莓小布丁

高脂喂养会导致鼠代谢异常，身体不适而躁动不安，引起自身炎症外，观察鼻子上的血是不是互相攻击同伴或者冲撞笼子所致外伤以及身上的湿润状是否撕咬所致，尽量保持安静清洁的饲养环境，密切观察大鼠身体精神状态。

3 回答984 围观

问研究急性髓系白血病的话，正常细胞系大家一般选择那个细胞系啊

汤姆卜丽波

一般采用人急性髓性白血病细胞系HL-60

2 回答446 围观

问复苏细胞数量过少，是继续培养？还是重新复苏？

偶然必然BMC5

细胞培养需要的时间不一样，条件相同，继续培养再试试！

8 回答729 围观

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