彭咕噜耶
Caco2细胞药物转运前后电阻值相差很大 我是用HBSS溶液溶解我的样品做转运
之前用这个样品浓度做了细胞毒性是没有毒性的
不知道为什么转运前后小室两侧电阻值差很大
怀疑1 我的操作破坏了单层膜 但这一点基本可以排除 之前同样的方法取样测碱性磷酸酶活性没有破坏单层膜 电阻值不会下降
怀疑2 药物对单层膜有损伤作用 但该浓度应该是无毒的呀 为什么会这样呢
求一个大佬解答
汤姆卜丽波
有可能是你的溶剂本身对药品后续的电阻测量完成了干扰
loveliufudan
可以从以下方面考虑:
药物溶解问题:虽然您使用了HBSS溶液溶解样品,但有时药物在某些溶剂中的溶解性会影响其生物活性。建议您尝试使用其他溶剂(如DMSO)溶解药物,并用相同浓度的DMSO作为空白对照,观察是否对电阻值有影响。
操作过程中的温度和时间:确保在整个实验过程中,细胞处于恒定的温度和CO2环境中。转运实验的时间过长可能会影响细胞屏障的完整性。
药物可能对Caco2细胞有未知的毒性或损伤作用。您提到的无毒浓度可能只是在细胞毒性实验中表现出无毒,但在转运实验中可能仍然存在未知的影响。建议您尝试不同浓度的药物,观察电阻值是否有相应变化。
考虑实验误差。确保测量电阻值的设备准确无误,避免在实验过程中产生误差。
检查细胞培养条件。确保Caco2细胞的培养条件适宜,保持良好的细胞生长和分化状态,以形成高质量的单层膜。
土井挞克树
建议转运后过一段时间再测电阻,因为刚转运会造成离子差,导致电阻测量失败
彭咕噜耶
转运过后隔了很久 去测电阻值还是很低 未加样品的空白溶液也是如此