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实验问答

31,451,717 科研人在看

问栓剂直肠给药如何对实验大鼠进行操作？

sswei

用栓剂给药时，要时刻观察是否有滑出栓剂的问题，以免影响实验结果，可捏紧肛门保持一段时间，也可固定动物头低位状态。

4 回答1569 围观

问可以用Elisa试剂盒测植物的酶活吗

土井挞克树

可以的，elisa可以测植物酶活。

3 回答1295 围观

问质粒提取浓度只有50ng/ul可以用于转染吗？

土井挞克树

可以的，如果效率不高可以少量多次的转染

4 回答7511 围观

问请问0.5%中性品红是什么？

土井挞克树

中性红，英文名称为Neutral Red，CAS号为553-24-2，分子式为C15H17ClN4，分子量为288.7753。可以用作酸碱指示剂，变色范围pH值6.8(红)～8.0(橙黄)；还用作生物染色剂等。组织或细胞核中的核酸、溶酶体(lysome)、硫酸粘多糖类、肥大细胞特殊颗粒等呈酸性。本中性红染色液呈酸性，适合用于固定的组织或细胞的染色，细胞内的酸性物质可被该染色液染成红色。本产品常用于

3 回答2359 围观

问如何避免qpcr阴性的污染

土井挞克树

每天要对这些区室进行清洁消毒，并紫外照射，特别是当阳性对照溅撒，环境检测阳性或者仪器污染时，严格按照消毒程序对区室消毒，并验证消毒效果。操作过程中避免手套接触可能被污染的地方，阳性对照最后加入，加后要特别注意枪头不要蹭到其他反应孔。

3 回答1098 围观

问WB，PVDF膜显影呈磨砂，颗粒状

loveliufudan

当在Western Blot显影后，PVDF膜呈现完全白色并具有颗粒感时，可能存在以下原因之一： 1. 过度曝光：过度曝光会导致所有区域的蛋白条带变得非常明亮，甚至超出线性范围。这可能会导致整个膜呈现一片白色。尝试减少显影时间或降低显影剂的浓度以避免过度曝光。 2. 背景信号过高：可能存在较高的非特异性背景信号。这可能是由于抗体结合不特异性的蛋白或试剂中存在的污染物引起的。确保使用高质量的抗体，并

3 回答1741 围观

问WB曝光的时候只有marker条带，是怎么回事，其他的蛋白都条带一点没有，重做一遍结果一样，是什么原因？

loveliufudan

当在Western Blot实验中只观察到marker条带而没有其他蛋白条带时，可能存在以下原因： 1. 样品加载量不足：确保您在加载样品时使用足够的蛋白量。如果加载量过低，可能导致蛋白条带无法被检测到。尝试增加加载量以获得更明显的蛋白条带。 2. 蛋白转移问题：确认蛋白成功转移到膜上。检查转膜的效率，确保蛋白在电泳过程中正确地转移到膜上。您可以使用Ponceau S染色或其他蛋白质染色方法来验证

3 回答5231 围观

问请问菌液PCR扩增产物多大比较合适（taq酶的）

凌晨三点Dxy

菌液pcr产物扩增的大小并不是固定的，可以根据实际需求进行选择。一般来说，如果需要检测菌液中是否存在某种特定的基因或者片段，可以选择扩增较大的片段，比如几百到几千bp的片段。这样可以更准确地检测出目标基因或片段是否存在，并且可以提供更多的信息。如果只需要检测菌液中是否存在某种细菌或病毒，可以选择扩增较小的片段，比如100bp左右的片段。这样可以更快地得到结果，并且可以减少扩增过程中可能出现的误差。

4 回答2106 围观

问Tricine-SDS PAGE三层胶的配方及注意事项

loveliufudan

以下是Tricine-SDS PAGE三层胶的配方和注意事项： 1. 垂直电泳缓冲液（上缓冲液和下缓冲液）： • 上缓冲液（Anode Buffer）：25 mM Tris，192 mM glycine，0.1%（w/v）SDS，pH 8.3。 • 下缓冲液（Cathode Buffer）：50 mM Tris，384 mM glycine，0.1%（w/v）SDS，pH 8.3。 2. 聚丙烯酰

3 回答2814 围观

问树突细胞鉴定流式细胞术（直接测量）需要买什么抗体

loveliufudan

在树突细胞鉴定的流式细胞术中，用于确定细胞类型的抗体可以包括以下一些： 1. CD11c：这是树突细胞的标志性表面分子，用于确认细胞为树突细胞的关键标记。 2. CD80（B7-1）和CD86（B7-2）：这些共刺激分子在树突细胞表面表达，并与T细胞激活和共刺激过程密切相关。 3. MHC-2（主要组织相容性复合体类II分子）：这些分子在树突细胞中高度表达，用于呈递抗原给CD4+ T细胞。 4.

4 回答1826 围观

问AAPH和ABTS原理

loveliufudan

原理如下： 1. AAPH：AAPH是一种自由基产生剂，它通过热解产生自由基，主要是氧自由基（ROO•）。在抗氧化实验中，AAPH会引发氧自由基的产生，这些自由基可以与抗氧化物质反应并被消耗。测定抗氧化能力时，添加被测试样品到含有AAPH的溶液中，然后测量在一定时间内自由基的消耗程度。抗氧化能力较强的样品会有效地消耗AAPH引发的自由基，导致自由基的减少。 2. ABTS：ABTS是一种人工合成的

3 回答13430 围观

问如何设计Fish探针

土井挞克树

fish探针设计方法：1.FISH使用的探针序列来源于基因组或BAC(细菌人工染色体)DNA，包含许多重复序列。串联重复序列(Tandemrepeat)，如存在于着丝粒的α卫星DNA(SatelliteDNA)；散在重复序列(Interspersedrepeat)，如Alu家族。2.探针中的这些重复序列，在与基因组杂交时易产生非特异信号3.人类Cot-1DNAx是在杂交中常用来封闭及去除重复序列的

3 回答7556 围观

问为什么稳转Gaussia luciferase的细胞系检测不到RLU？

土井挞克树

可能是转染后存在降解，一般降解发生的比较快，降解后就检测不到rlu了

3 回答916 围观

问请教酵母转化，醋酸锂转化法相关问题

土井挞克树

以下为酵母醋酸锂转化法的步骤：l.于5mlYPD液体培养基中接种酿酒酵母，300C下200rpm过夜振荡培养。2.计数过夜培养的细胞密度，以5x106个／ml的最终细胞密度接种于50mlYPD培养液。3.置300C条件下200rpm振荡培养至细胞浓度为2x107个细胞_Jml，通常须要3．5小时，该培养物的细胞足够约可用于l0次醋酸锂转化。4.离心，添加醋酸锂

2 回答3399 围观

问IPTG诱导大肠杆菌实验中，大肠杆菌培养多久可加IPTG进行诱导？

Eule科研顺利

摇到OD=0.6-0.8之间加入IPTG

4 回答7626 围观

问如何确立高效液相色谱法测定有关物质的方法？

凌晨三点Dxy

确立高效液相色谱法测定有关物质的方法需要以下步骤：确定检测目标：确定需要测定的物质，如药品、食品、化妆品等。选择色谱条件：根据目标物质的特点，选择合适的色谱柱、流动相、流速等条件。确定检测波长：选择合适的检测波长，通常选择最大吸收波长或者常用波长。制备标准溶液：制备目标物质的标准溶液，并确定标准曲线。进行样品处理：将样品进行处理，如过滤、萃取、浓缩等。进行色谱分析：将样品注入色谱柱，进行分离分析。

3 回答1930 围观

问求红霉素抗性使用方法

凌晨三点Dxy

红霉素抗性使用方法包括以下步骤：口服或深层肌注，适用于反刍家畜、草食动物等。片剂有0.1g/片、0.25g/片、0.125g/片，每天内服量不同。禽每天用量10mg/kg体重，混饮浓度为0.01%，连用3-5d。注射用乳糖酸红霉素，用量为牛、马、羊、猪1-2mg/kg体重，犬、猫1-5mg/kg体重，成年鸡1ml/10羽，2次/d。使用时需要注意，避免过量使用。

3 回答1338 围观

问细胞污染求助

dxy_bim8kk56

想问问大佬们，怎么看细胞死了，被污染了啊？实验小白😭😭😭

4 回答348 围观

问测定海参中的钒含量采用哪种方法比较好

土井挞克树

石墨炉原子吸收的方法比较精确，ICP-MS相对精准性差一些

4 回答579 围观

问科研小白，请教各位前辈指教：PBMC培养48h后流式检测T细胞凋亡发现细胞凋亡的很多。

dxy_mxfl1wp9

博主，请问现在有找到什么好方法分PBMC里面的T细胞吗，我最近做的实验图和你的好像，很多死细胞，背景特别不干净，T细胞也很少

3 回答787 围观

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