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        如何确立高效液相色谱法测定有关物质的方法?

        相关实验:单胺氧化酶活性测定

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        洪呀呀H


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        3 个回答

        user-title

        凌晨三点Dxy

        有帮助

        确立高效液相色谱法测定有关物质的方法需要以下步骤:


        确定检测目标:确定需要测定的物质,如药品、食品、化妆品等。

        选择色谱条件:根据目标物质的特点,选择合适的色谱柱、流动相、流速等条件。

        确定检测波长:选择合适的检测波长,通常选择最大吸收波长或者常用波长。

        制备标准溶液:制备目标物质的标准溶液,并确定标准曲线。

        进行样品处理:将样品进行处理,如过滤、萃取、浓缩等。

        进行色谱分析:将样品注入色谱柱,进行分离分析。

        进行数据处理:根据色谱图,计算目标物质的含量和杂质含量。

        确定方法可靠性:进行方法学验证,如精密度、准确度、灵敏度等。

        确定方法适用性:进行实际样品测定,验证方法的适用性。

        优化方法:根据实际情况,对方法进行优化,提高方法的稳定性和可靠性。

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        土井挞克树

        有帮助

        高相液谱法检测有关物质的方法有:(1)杂质对照品法(适用于已知杂质);(2)主成分自身稀释对照法(适用于一般杂质检查,杂质成分少且尚不能取得其对照品,简称“自身对照法”);(3)归一化法(现已不多用)。前法为外标法、定量检测;后两法均为限量检测。自身对照法又可分为加校正因子计算和不加校正因子计算。目前,国内多采用后法。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        通常需要以下步骤:

        1. 目标物质的特性:首先,了解目标物质的化学性质、物理性质和药理性质,包括分子量、极性、溶解性等。这将有助于选择适当的分析条件和检测方法。

        2. 样品前处理:根据需要,对样品进行前处理,如提取、过滤、稀释等,以去除干扰物质并提高分析的准确性和灵敏度。

        3. 色谱柱选择:选择适当的色谱柱,考虑目标物质的极性、分子大小以及分离的要求。常见的色谱柱类型包括反相色谱柱、离子交换色谱柱、凝胶色谱柱等。

        4. 流动相的优化:选择合适的流动相,包括溶剂和缓冲剂,以使目标物质在色谱柱中获得良好的分离和保留。

        5. 检测器选择和条件设置:根据目标物质的特性,选择合适的检测器,如紫外-可见光谱检测器、荧光检测器等,并设置适当的检测条件,如波长、流速等。

        6. 校准曲线和定量分析:使用已知浓度的标准品制备校准曲线,通过测定目标物质的峰面积或峰高与浓度的关系,进行定量分析。

        7. 方法验证和验证参数:对所建立的方法进行验证,包括准确性、精密度、线性范围、选择性等参数的评估,以确保方法的可靠性和可重复性。


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