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实验问答

23,045,641 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问可以用Elisa试剂盒测植物的酶活吗

土井挞克树

可以的，elisa可以测植物酶活。

3 回答906 围观

问如何避免qpcr阴性的污染

土井挞克树

每天要对这些区室进行清洁消毒，并紫外照射，特别是当阳性对照溅撒，环境检测阳性或者仪器污染时，严格按照消毒程序对区室消毒，并验证消毒效果。操作过程中避免手套接触可能被污染的地方，阳性对照最后加入，加后要特别注意枪头不要蹭到其他反应孔。

3 回答861 围观

问菌液提蛋白也是用BCA法测蛋白浓度吗？

麻黄连翘赤小豆

可以的，测蛋白浓度就可以用BCA法，或者直接用蛋白定量仪

4 回答518 围观

问WB，PVDF膜显影呈磨砂，颗粒状

loveliufudan

当在Western Blot显影后，PVDF膜呈现完全白色并具有颗粒感时，可能存在以下原因之一： 1. 过度曝光：过度曝光会导致所有区域的蛋白条带变得非常明亮，甚至超出线性范围。这可能会导致整个膜呈现一片白色。尝试减少显影时间或降低显影剂的浓度以避免过度曝光。 2. 背景信号过高：可能存在较高的非特异性背景信号。这可能是由于抗体结合不特异性的蛋白或试剂中存在的污染物引起的。确保使用高质量的抗体，并

3 回答1383 围观

问WB曝光的时候只有marker条带，是怎么回事，其他的蛋白都条带一点没有，重做一遍结果一样，是什么原因？

loveliufudan

当在Western Blot实验中只观察到marker条带而没有其他蛋白条带时，可能存在以下原因： 1. 样品加载量不足：确保您在加载样品时使用足够的蛋白量。如果加载量过低，可能导致蛋白条带无法被检测到。尝试增加加载量以获得更明显的蛋白条带。 2. 蛋白转移问题：确认蛋白成功转移到膜上。检查转膜的效率，确保蛋白在电泳过程中正确地转移到膜上。您可以使用Ponceau S染色或其他蛋白质染色方法来验证

3 回答3997 围观

问0.1M，pH为7.4的PBS的配方？

loveliufudan

PBS（磷酸盐缓冲盐水）的常用配方是以0.1 M浓度的磷酸盐和0.15 M浓度的氯化钠制备，pH值调整至7.4。下面是一种常见的PBS配方： 1. 准备0.1 M磷酸盐缓冲液（pH 7.4）： • Na2HPO4 (二硫酸钠) 7.21 g • NaH2PO4·H2O (磷酸氢二钠) 1.15 g将上述两种化合物分别溶解在适量的去离子水中，然后混合调整至pH 7.4。请注意，调整pH时可以使用稀盐

3 回答20077 围观

问加入loading buffer后再重新蛋白定量影响有多大。

麻黄连翘赤小豆

重新蛋白定量肯定不准，且没有必要，溴酚蓝是一种常用的电泳指示染料，蛋白定量一般在加loading buffer之前

3 回答590 围观

问Tricine-SDS PAGE三层胶的配方及注意事项

loveliufudan

以下是Tricine-SDS PAGE三层胶的配方和注意事项： 1. 垂直电泳缓冲液（上缓冲液和下缓冲液）： • 上缓冲液（Anode Buffer）：25 mM Tris，192 mM glycine，0.1%（w/v）SDS，pH 8.3。 • 下缓冲液（Cathode Buffer）：50 mM Tris，384 mM glycine，0.1%（w/v）SDS，pH 8.3。 2. 聚丙烯酰

3 回答1921 围观

问AAPH和ABTS原理

loveliufudan

原理如下： 1. AAPH：AAPH是一种自由基产生剂，它通过热解产生自由基，主要是氧自由基（ROO•）。在抗氧化实验中，AAPH会引发氧自由基的产生，这些自由基可以与抗氧化物质反应并被消耗。测定抗氧化能力时，添加被测试样品到含有AAPH的溶液中，然后测量在一定时间内自由基的消耗程度。抗氧化能力较强的样品会有效地消耗AAPH引发的自由基，导致自由基的减少。 2. ABTS：ABTS是一种人工合成的

3 回答11661 围观

问IPTG诱导大肠杆菌实验中，大肠杆菌培养多久可加IPTG进行诱导？

Eule科研顺利

摇到OD=0.6-0.8之间加入IPTG

4 回答6072 围观

问GC-MS前处理是不是必须要冻干研磨成粉才可以提取代谢物？

土井挞克树

也可以不冻干直接用匀浆提取，但是相对来说准确度不如冻干样品

3 回答578 围观

问双酶切验证成功，但测序结果显示空载怎么回事？

dxy_mqg1dtg8

是不是两个酶切位点距离太近，或者是载体上其他地方还有这两个酶切位点

4 回答1878 围观

问非靶向代谢组学实验中仪器的选择

dxy_mqg1dtg8

UPLC-Q-TOF/MS和UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS/MS都是常用的非靶向代谢组学检测仪器，它们之间的主要区别在于分离柱、检测器和质谱分析器的不同。具体如下：1. 分离柱：UPLC采用超高效液相色谱柱（Ultra Performance Liquid Chromatography），其粒径和长度均比传统的高效液相色谱柱（HPLC）小，因此分离能力更强，分离效率更高。

4 回答1487 围观

问GST pull-down 对照试验如何设计？

土井挞克树

一般对照都是采用gst成分保留在融合蛋白上，然后用gst结合在谷胱甘肽琼脂糖作为对照实验

3 回答971 围观

问Meta分析异质性究竟是怎么算的啊

sswei

异质性超出合理范围的meta分析，得到的结论常常让人觉得不可靠，没有意义。所以异质性是必然存在的，但要在合理的范围。由此可见，异质性分析也是必不可少的。一般来说I square<50%，P>0.05是被认为可接受的Meta回归，看到底是哪个因素导致的异质性，当然了，如果影响因素很明显或者涉及因素很少的话，也没有必要做meta回归，直接做亚组分析就好了。觉得结果不稳定应用敏感性分析。敏感

3 回答747 围观

问普通meta直接比较有意义，但网状meta显示无差异

loveliufudan

在进行meta分析时，出现普通meta分析的两两比较显示有意义，而网状meta分析显示无差异，并且节点法检验提示不存在不一致性的情况，可以有以下解释： 1. 异质性的存在：尽管节点法检验显示不存在不一致性，但普通meta分析和网状meta分析结果之间的差异可能反映了潜在的异质性。异质性指的是研究间差异的存在，包括样本特征、方法学差异等。普通meta分析对异质性较为敏感，而网状meta分析可能具有更

3 回答719 围观

问如何查脂肪酸详细代谢过程

sswei

可以使用METLIN数据库来进行查找。

3 回答621 围观

问荧光微球免疫层析试纸条（湿法）只有c线

云淡风轻2023

请问你解决了吗这个问题，我做的是纳米酶标记，也是没有T线，就好像没画T线一样没有一点你是用的夹心法还是竞争法啊

5 回答765 围观

问stata16自带的meta怎么进行剪补法？

dxy_mqg1dtg8

剪补法是一种常见的修复偏移的方法，可以尝试以下步骤：1. 打开State16自带的mate，找到发生偏移的部分。2. 在偏移的部分左右两侧各选取一段相同的背景区域作为参考，尽可能选取与偏移部分颜色和纹理相似的区域。3. 使用修补工具（如Photoshop中的修复画笔或克隆工具）对偏移部分进行修复。具体操作方法是：在选取的参考区域内，使用修补工具复制一段与偏移部分相同的纹理，然后在偏移部分上粘贴并调

2 回答1478 围观

问科研小白，请教各位前辈指教：PBMC培养48h后流式检测T细胞凋亡发现细胞凋亡的很多。

dxy_mxfl1wp9

博主，请问现在有找到什么好方法分PBMC里面的T细胞吗，我最近做的实验图和你的好像，很多死细胞，背景特别不干净，T细胞也很少

3 回答572 围观

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