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在纯化离心金标抗体时,会有损失怎么避免呢?离心纯化过程,重悬过程有什么注意事项吗?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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卖火柴维生素呐

重悬液是用PBS. 吐温20,PEG20000配置吗?不加叠氮化钠可以嘛?谢谢大家解答疑问

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3 个回答

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huarenqiang5

有帮助

重悬液配制:0.01MPB+1%BSA+10%蔗糖,11000rpm,35min十分之一重悬液重悬。

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土井挞克树

有帮助

在抗体纯化过程中,可以在重悬过程可以加冷冻保护剂甘油来避免损失

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loveliufudan

有帮助

在纯化离心金标抗体时,确实可能会有损失。以下是一些建议来避免损失:

1. 选择合适的离心条件:在离心纯化过程中,使用合适的离心参数,如转速和离心时间,以确保最大程度地沉淀离心金标抗体而不造成损失。

2. 调整缓冲液的pH和离心速度:离心金标抗体的选择和调整缓冲液的pH值,以最大程度地促进离心金标抗体的沉淀和纯化过程。

3. 尽量避免过滤步骤:过滤可能会导致抗体的损失,因此在离心纯化过程中尽量避免过滤步骤。

在重悬液的配制和使用中,以下是一些注意事项:

1. 选择合适的缓冲液:对于重悬液,使用PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)是常见的选择,可以提供适当的离子强度和pH值来稳定抗体。

2. 添加适量的吐温20:吐温20是一种表面活性剂,可以在重悬液中帮助稳定抗体。添加适量的吐温20,可以防止抗体在重悬液中凝聚或附着在管壁上。

3. 使用PEG20000:PEG(聚乙二醇)是常用的沉淀剂,可用于抗体的沉淀和浓缩。使用合适浓度的PEG20000可以帮助抗体在重悬液中保持稳定。

4. 不加叠氮化钠:叠氮化钠(NaN3)是一种抑制微生物生长的物质,常用于抗体保存液中。在重悬液中不加叠氮化钠是可以的,但如果您计划保存抗体,添加适量的叠氮化钠可以预防微生物污染。

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