1.为什么每次都加一样的上样量，电泳和转膜条件不变，跑出来的条带可以相差巨大？2. 一抗4°孵育，稀释后抗体能重复使用多久？

1、胶配的不均匀或者抗体敷的不匀都会导致结果不同2、稀释后的抗体如果短期内不用可以在-20℃保存，短期内一直使用的话4℃保存，可以根据使用次数来判断重复使用次数，一个月到半年都是可以的

正常的话4℃保存能保存一个月以上，如果反复使用或者长时间暴露可能会降低时长，可以在-20℃保存，可以保存很久

1. 跑电泳和转膜过程中条带的差异可能由多种因素引起，包括：

• 样品质量和纯度：样品中的杂质、降解产物或其他不纯物质可能影响条带的形成和迁移。

• DNA或蛋白质的大小：不同大小的DNA或蛋白质可能在电泳或转膜过程中以不同的速度迁移或转移。

• 电泳条件：电场强度、电泳时间和缓冲液的配制等电泳条件可能影响条带的分辨率和形态。

• 转膜条件：转膜膜的类型、电流密度和转膜时间等因素可能影响蛋白质的转膜效率和均匀性。

如果出现不一致的结果，您可以尝试优化实验条件，包括纯化样品、调整电泳条件、检查转膜膜和缓冲液等，以提高结果的一致性和可重复性。

2. 一抗的稀释后能重复使用的时间取决于抗体的稳定性和纯度，以及使用条件的规范性。一般来说，如果抗体保存和使用条件得当，一抗稀释后可重复使用的时间可以从数天到几个月不等。

为确保抗体的性能和效果，以下因素需考虑：

• 储存条件：将抗体存储在适当的温度和储存液中，避免冻融循环和暴露于光照。

• 稀释液：使用适当的稀释液，如PBS或BSA溶液，避免加入可能引起交叉污染或降解的物质。

• 重复使用次数：建议在重复使用前先进行验证，确保抗体的活性和特异性仍然存在。