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用cdna一直克隆得不到目的条带怎么办呀
sswei
1,将前期扩的产物稀释后做模板,再PCR。2, 更换引物,将引物设计位于ATG之前,也就是去扩增mRNA片段,然后以它为模板稀释后扩增CDS区3, 更换Taq酶,普酶换高保真,高保真换普酶等。
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问
想要做逆转录和qpcr但存在基因组DNA污染,请问有没有什么方法能最大限度的保留rna样品,并去除DNA的污染?
loveliufudan
要最大限度地保留RNA样品并去除DNA污染,可以尝试以下方法: 1. DNase消化:使用DNase酶对样品进行消化,以降解其中的DNA。这样可以有效地去除DNA污染,但需要小心控制反应条件和时间,以确保RNA不受到降解。 2. DNase处理后的RNA再逆转录:在DNase消化后,使用逆转录酶将RNA转录成cDNA。由于DNase只能降解DNA而不影响RNA的逆转录,这将帮助你获取只包含RNA的
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问
钙黄绿素和碘化丙啶可以用来染细菌吗,怎么配浓度?
huarenqiang5
都可以用来染细菌,钙黄绿素染细菌建议浓度为5-10μM。
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问
求助 怎么查基因序列 文章没给genbank号,也没列出基因序列,只在support里写了引物
huarenqiang5
建议使用NCBI查找基因序列试试看能找到不。
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问
TUNEL荧光检测试剂盒冰冻切片染色
huarenqiang5
主要有以下几点弊端:1)不容易做连续切片和较薄的切片。2)组织块在冻结过程中产生的冰晶影响细胞的形态结构及抗原物质的定位。组织结构不如石蜡切片好,切片较厚、不易得到很好的连续切片,且操作时容易破碎(易破碎的样品在冰冻前可用10%明胶或2%琼脂糖包埋)。由于组织内的水份起到包埋剂的作用,在组织冰冻的过程中,一旦冰晶的核心形成,它们就逐渐膨胀,并破坏所有围绕它们的细胞器。当冰冻的组织切片贴到玻片上时,
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问
96孔测定 mic的疑问
huarenqiang5
可以按下面步骤操作: 将无菌棉签用生理盐水润湿后,直接取过夜培养皿上数个新鲜菌落,与适量无菌生理盐水混匀。然后,用标准比浊管或者浊度计校正菌液浓度至0.5麦氏单位(1~2×108CFU/mL)。最后,用试剂盒中的肉汤按照使用说明书要求的倍数稀释,混匀备用。 菌液接种除空白对照外,其余的95孔加入制备好(用前要混匀)的菌液100µL空白对照孔中加入100µL无菌肉汤。盖好
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帮忙看看细胞数量呀
麻黄连翘赤小豆
差不多有的,最好做个细胞计数,一般这样的细胞可以传代或者直接提取了
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问
膜片钳实验求助
huarenqiang5
主要考虑是漏电流导致,建议把漏电先解决试试。
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细胞免疫荧光
dxyc42u
一次做四个片不算重复,可以通过统一调节增加对比情况
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海马呼吸seahorse小于0是怎么回事
loveliufudan
海马的呼吸值不可能小于0,因为负数值不适用于描述呼吸过程。呼吸值通常是用来表示气体浓度或其他相关指标的正数。海马通过鳃来呼吸水中的氧气,并将二氧化碳释放到水中。
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问
流式数据分析
sswei
流式细胞检测结果根据不同图像的类型,看法不一样。1.直方图,横坐标代表荧光信号或散射光信号相对强度,纵坐标一般是相对细胞数。2.散点图,散点图是双变量图的,与直方图比较,其分析通量更高,因此能更好的观察到较小比例细胞群,横坐标和纵坐标都是光信号,点图上的每一个点可以代表某一个细胞的信息。3.密度图,密度图可以表示一个标记的表达水平,而且还可以显示出固定区域中事件的相对密度。可以分为密度图、斑马线图
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问
甲状腺H&E切片求助
huarenqiang5
横切面呈蝶形或者马蹄形,基本左右对称,纵切面呈长梭形或长椭圆形,包膜光整,边界清晰,内部回声中等偏强,分布均匀,可见血管回声。 切面视角在横切面视角可以比较清晰完整地观察甲状腺和结节,包括左右腺叶、峡部、气管和食管的位置关系以及颈动脉、颈静脉、胸锁乳头肌、带状肌结节的纵横比判断也是以横切面为主。还可以观察到喉返神经的位置关系做一个大致的方位判断;纵切面视角可以比较清
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问
求助WB一抗属性
麻黄连翘赤小豆
对,可以用小鼠抗小鼠,说明书能用就可以,就有时候会有非特异性条带出现
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膜片钳求助!!!
huarenqiang5
可能是软件出现问题了,建议联系公司工程师解决。
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氧化成一个还原型?是否矛盾?
loveliufudan
在谷胱甘肽过氧化物酶系统中,两个分子的谷胱甘肽(GSH)通过形成连接半胱氨酸残基的二硫键被氧化成一分子还原型谷胱甘肽(GSSG)。这是因为氧化作用引起了GSH中两个半胱氨酸残基的氧化反应,从而形成了GSSG。换句话说,GSH分子中的两个半胱氨酸残基之间的二硫键被打破,生成了两个GSH分子中的一个GSSG分子。谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase)则催化了将GSSG还原回GSH
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问
cck8实验,药物浓度越高 OD吸收越高
麻黄连翘赤小豆
药物沉淀对吸光度影响较大,最好能溶解药物
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问
求阿尔兹海默症小鼠视网膜神经节细胞!!!
麻黄连翘赤小豆
上海或者武汉都有细胞库,有官网可以去找,培养细胞一般官网都有介绍,基本都差不多
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问
脂多糖诱导人气道上皮细胞模型?
huarenqiang5
建议用25μg·mL^(-1) LPS诱导细胞24h。
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细胞膜仿生纳米粒子制备
huarenqiang5
可以使用溶胞法提取:这是一种简单、有效的细胞膜获得方法,其原理是使用溶胞酶溶解细胞,使细胞膜脱离细胞,从而获得细胞膜。溶胞法可以有效获得低粘度细胞膜,其结构和性质可以很好地控制,也可以有效保存细胞膜的复杂结构和性质,是一种理想的细胞膜获得方法。
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为什么全胚化学原位杂交阴性对照还有颜色信号
dxy_br5187n
正常情况下阴性对照是不能有颜色信号的。如果你做的全胚化学原位杂交实验阴性对照每次都有颜色信号的话,通常是由于探针或抗体滞留于胚胎体腔和体室以及杂交后漂洗的条件不够严格等。杂交预处理前,将胚胎在解剖镜下用细针在脑室、颈背部、颌面部和心室等处刺孔,以使反应后的探针或抗体不在这些部位滞留。并在漂洗时充分洗除。同时。杂交后使用RNA酶充分消化未杂交的标记RNA探针,提高杂交后漂洗的严格度,抗体反应后充分漂
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