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        包涵体复性后颜色偏棕色?

        相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

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        科研小废物一枚

        想请教大家,蛋白包涵体沉淀(颜色偏棕色)加入复性液重悬振摇四小时后,液体变澄清,但颜色偏棕色,是振摇时长不够吗,还是和蛋白包涵体原本颜色有关?

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        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑是包涵体之前就有色素沉着或污染,与操作过程关系不大

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        与振摇时长关系不大,主要是蛋白包涵体原本颜色有关

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        颜色偏棕色的液体可能是由于蛋白包涵体原本的颜色导致的,其中可能含有杂质或残留物。复性液的作用是将蛋白包涵体溶解并帮助其正确折叠,因此在复性过程中液体澄清是正常的。

        振摇时长不够可能不是导致颜色偏棕色的原因,因为振摇的目的是促进蛋白包涵体的重悬和混合,而不会直接影响液体的颜色。

        要更好地了解液体颜色偏棕色的原因,可以考虑以下几点:

        1. 蛋白包涵体的成分:某些蛋白包涵体可能本身具有棕色或偏棕色的颜色,这可能是由于其组成成分或特定蛋白质的性质所致。在这种情况下,颜色不一定表示有问题。

        2. 杂质或残留物:蛋白包涵体中可能存在其他杂质或残留物,这些物质可能导致液体的颜色变化。在复性过程中,一些杂质可能会被除去,但不一定会完全消除,导致液体仍然保持一定的颜色。

        如果您担心颜色变化可能影响实验结果或纯度,请考虑进行后续步骤来进一步净化蛋白样品,例如使用柱层析或其他纯化方法。此外,对蛋白包涵体的进一步分析,如SDS-PAGE或质谱分析,也可以帮助确定其组成和纯度。

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