RAW264.7用RANKL诱导破骨细胞的问题

普遍现象，总结经验和文献后可能原因有2个：

一是选择RANKL最好是对应RAW细胞株的，鼠源还是人源。

二是RANKLE浓度一般是50ng/ml，而且是自身浓度，不是培养基稀释后的浓度。

考虑以下几点：

1.细胞生长过老，破碎的细胞残骸；

2.血清质量不好，反复冻融的结果；

3.配制培养基的ph值偏高，不宜细胞生长；

4.配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点。

你可能加的太多了，少量多次一般不会变黑点。