实验问答22,206,303 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问求助贴，WB检测BV2细胞中TLR4的表达一直跑不出来

sswei

无条带的原因很多，要逐一排除哦，比如：抗体用错，转膜出错，抗原无表达，试剂失效等，都会导致空白条带。

4 回答1058 围观

问请问一下，问什么蛋白表达中，集菌破碎之后，液体是黄色的，而且过完分子筛之后，跑胶之后，条带还是很杂？

loveliufudan

蛋白质表达过程中，液体颜色的黄色可能是因为存在大量的细胞裂解产物或者富含色素的蛋白质。条带杂乱的问题可能是由于目标蛋白质表达量较低，或者存在其它杂质蛋白质或者表达产物。为了解决这些问题，您可以考虑以下几点：优化菌落培养条件以提高目标蛋白质表达量。在破碎细胞时使用更加彻底的方法，如超声波或高压均质等方法，以确保细胞完全破裂释放蛋白质。使用更加纯净的蛋白质分离方法，例如磷酸盐缓冲液（PBS）或甘氨酸盐

5 回答497 围观

问请问一下透析袋前处理一般是直接用水煮沸10分钟就可以吗

土井挞克树

是的，煮沸消毒，少数的需要进行抗凝处理

5 回答4343 围观

问ROC曲线联合后面积反而小了？

loveliufudan

当联合诊断时，ROC曲线面积小于某个单独指标的ROC曲线面积，可能是由于联合诊断的方法不当，或者指标之间存在一定的相关性。以下是可能的解决方案：检查联合诊断方法是否正确。在联合诊断中，可能需要使用特定的计算方法，如逻辑回归、支持向量机等。如果方法不当，可能会导致ROC曲线面积的下降。检查指标之间的相关性。指标之间存在一定的相关性可能会影响ROC曲线的面积。在这种情况下，可以使用因子分析或者其他方法

3 回答1950 围观

问咪唑洗脱蛋白梯度顺序错了有什么影响吗，怎么补救

dxyc42u

应该是要重新洗脱了，没听说过有什么好的补救措施

5 回答1053 围观

问慢病毒载体转导增强剂

sswei

慢病毒载体转导增强剂有LVTE，聚乙烯醇，辅酶A，聚赖氨酸，硫酸羊膜素等。

4 回答634 围观

问pspcas9质粒能代替plko1用三质粒系统包装慢病毒吗？

sswei

pspcas9质粒代替plko1用三质粒系统包装慢病毒的效果较差。

4 回答471 围观

问蛋白质翻译后修饰发生的亚细胞定位是否可通过修饰位点预测。

huarenqiang5

Sionalp 可以对革兰氏阳性菌，董兰氏阴性菊和直核生物的蛋白质序列进行信号肽分析。预测采用了隐马尔可夫和人工神经网络技术的融合。其训练数据是从 SwisProt 第 29 版中挑选来的，分为真核生物，革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌三组。除了 SignalP 可以对蛋白质序列进行信号肽分析外，还有诸如 Phobius、Philius、Spoctopus、Si

4 回答647 围观

问如何将纤连蛋白包被过的孔板中的细胞消化下来

土井挞克树

可以用刮刀，但是要注意操作的轻柔，避免影响到细胞

4 回答265 围观

问【求助】结晶紫染色李斯特菌生物膜

土井挞克树

一般脱色20min左右就可以进行酶试验检测了

3 回答1838 围观

问趋化因子SDF-1做MDA-MB-231细胞的迁移实验！没有效果啊！有没有大神帮一帮！！

huarenqiang5

可以参考一下这篇文献《CXCL12诱导乳腺癌细胞CXCR4表达并促进癌细胞骨转移》。

3 回答320 围观

问请问这种该怎么配啊，是两个配好之后1比1混合还是最终的浓度，pH8.0是整体的还是EDTA-NA2的。

土井挞克树

是最终的浓度，ph也是整体的ph

4 回答870 围观

问跑胶出现拱形是什么问题？

土井挞克树

胶的问题，胶制的不平整，调整模具后再跑

6 回答823 围观

问内参3条为什么（βactin）

土井挞克树

考虑体系中有物质降解，所以会出现重复多条

5 回答754 围观

问ip酸洗脱结果分析求助

土井挞克树

考虑有蛋白分解，所以你的目的蛋白看不到

3 回答680 围观

问SDS-PAGE蛋白电泳跑胶，怎么能不带纹理，且胶面干净？

土井挞克树

震荡把气泡去除，或者ph调酸一些

4 回答947 围观

问WB配的胶在外面放了一夜还能用吗？

balalaLy

重新制吧，制个胶也很快的，比重新跑一次wb快多了。

5 回答3253 围观

问capto core700纯化VLP的问题

dxy_8u4t2z0e

想问一下你的问题解决了吗，我最近在做纯化VLP的实验，结果裂解液中有蛋白，浓度也还可以，但是收取峰值的流穿时什么都没有。想问一下你说如何解决的呢？

4 回答499 围观

问3T3L1融合度怎么判断

skyye

图1.2的细胞融合度大约60-70%吧，个人觉得传代或者诱导可以再满一点点，看空白区细胞也还是有空间生长的

4 回答577 围观

问求成脂诱导液配制方法！！拜托拜托，有没有好心人告诉一下具体配置的方法啊

sswei

成脂成骨诱导分装到48孔或24孔，地塞米松（DEX），称取4mg地塞米松，溶于10mL 无水乙醇中，0.2μm无菌滤膜过滤后，分装到EP管中，配成10-3mol/L（1000X）储存液，-20℃冰箱保存。IBMX，100mg，溶于9mL 二甲基亚砜（DMSO）中，0.2μm无菌滤膜过滤后，配成50mmol/L的储存液（100X），-20℃冰箱保存。IDM（吲哚美辛），称取89.45mg 溶于5

4 回答327 围观

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