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        内参3条为什么(βactin)

        相关实验:表达蛋白检测实验

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        实验小小小白

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        5 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑体系中有物质降解,所以会出现重复多条

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        申东熙老伯

        有帮助

        可能一抗浓度高了,出现了非特异性结合。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        考虑蛋白有降解,补加蛋白酶抑制剂。在保证充分抽提蛋白的同时尽量快速操作,离心后尽快变性再保存。

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        秋秋欣欣

        有帮助

        转膜的时候没有动夹子的话,可能是蛋白或者没封闭好,或者一抗时间太久出现了非特异性条带

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        loveliufudan

        有帮助

        可能有以下几个原因:

        基因家族:β-actin是肌动蛋白基因家族中的一员,可能存在多个亚型,这些亚型可能会被扩增出来,从而出现多条内参带。

        剪接变异:β-actin基因可能存在多种剪接变异形式,这些变异形式可能在PCR扩增中被扩增出来,从而出现多条内参带。

        杂交:在qPCR扩增的过程中,由于反应体系的复杂性,可能会出现非特异性杂交,导致出现多条内参带。这种情况下,您可以尝试优化PCR反应体系,如调整引物浓度、温度、退火时间等,以消除杂交的影响。

        如果您确定出现多条内参带是由于基因家族或剪接变异引起的,您可以尝试使用其他的内参基因来进行标准化,如GAPDH、18S rRNA等。在选择内参基因时,建议使用已有文献或实验室的标准操作程序,以确保准确、可靠的数据分析。

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