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        SDS-PAGE蛋白电泳跑胶,怎么能不带纹理,且胶面干净?

        相关实验:单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

        user-title

        TheRainbow777

        图片描述

        上面有纹路,不知道如何去除,有说加助溶剂,但是什么名字的没说到,不知道用什么。图片描述

        这是别人提供的,看着底面特别干净,怎么能做到这种程度?希望大咖能指导下,万分感谢!



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        4 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        震荡把气泡去除,或者ph调酸一些

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        温度较低时加大TEMED 和过硫酸胺的量,过硫酸胺必须新鲜配制。如若还是不行重新配制一下缓冲溶液。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        建议:1.加样前离心,加适量样品促溶剂;2.待其充分凝固再作后续实验;3.在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        在进行SDS-PAGE蛋白电泳时,如果希望获得干净的胶面和没有纹路的凝胶,需要注意以下几点:

        制备凝胶时,要仔细控制凝胶浓度和均匀混合升华剂。确保凝胶成分充分混合,凝胶浓度均匀,以避免形成空洞和不均匀的凝胶。

        在电泳前,将样品彻底混合,并加入适量的SDS缓冲液,保证蛋白样品充分解离和均一化。

        控制电泳电流和电压,以防止电泳电流过大或电压过高,造成凝胶变形或溢出。通常使用较低的电流和电压进行电泳,使凝胶温度不超过室温。

        电泳完毕后,立即停止电源并将凝胶取出。注意避免凝胶破裂或变形,应使用平整的夹子将凝胶取出。

        如果发现凝胶表面有纹路,可以使用助溶剂进行处理,例如将凝胶浸泡在甲醇、丙酮或二甲基亚砜等溶剂中,使凝胶表面平滑,但这可能会影响蛋白质的转移效率。建议在进行这些操作前,应先在小规模试验中测试助溶剂对蛋白质转移的影响。

        最后,在染色前应将凝胶浸泡在去离子水中清洗,去除残留的试剂和缓冲液,以避免染色不均匀。

        要使SDS-PAGE蛋白电泳获得干净的胶面和无纹路的凝胶需要注意多个细节,并进行实验的多个环节严格控制,这需要在实验操作中积累经验,并不断改进优化实验流程。

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