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问
R语言的cox预测模型的校准曲线
loveliufudan
似乎是在 calibrate 函数的调用中出现了问题。具体来说,错误信息中提示说您必须在原始拟合函数中指定 x=T 和 y=T,但是在您的代码中并没有明确指定这些参数。因此,您需要检查以下几点:在 cph 函数的调用中,您是否明确指定了 x=T 和 y=T。这两个参数分别指定是否返回风险比例和生存概率,是 calibrate 函数需要的参数之一。检查 calibrate 函数的调用中是否有语法错误
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问
高效液相色谱等度能出峰,梯度没峰的原因,是混合比例阀的问题吗,需要怎么排查?
土井挞克树
可以取一组已知比例的样品,然后加样验证,如果条带不佳可能是比例阀的问题
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问
做coip时候,ip后目的条带比input的条带高怎么解决。
土井挞克树
1、排除IP条带不是IgG的重链和轻链。2、排除一抗或者二抗没有污染,一般用新配的抗体理论上说IP的条带要和Input的一样。3、把核酸消解就会变正常。
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问
如果一个样品的浓度很低,我可以取同组多只样本一起进行提取吗?
土井挞克树
可以的,一起提取提高提取量。或者分开提取后混合
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问
蛋白互作-免疫共沉淀
sswei
蛋白质-蛋白质相互作用是指两个或两个以上的蛋白质分子通过非共价键形成 蛋白质复合体的过程。蛋白质与蛋白质之间的相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,对调控细胞及其信号有重要意义。蛋白质互作研究按照实验目的可分为两大类,一是验证两个蛋白是否存在相互作用,二是筛选某个兴趣蛋白的互作蛋白。据此是可以通过共价键形成ABC蛋白。
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问
RIPA提蛋白!
土井挞克树
一般不会改变蛋白结构,但是在提取过程中理化性质改变也会引起蛋白降解
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问
血清TG
土井挞克树
先检查模型是否造模成功,然后调整药量做三次,看结果差异
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问
慢病毒转导之后传代问题
sswei
首先,确定病毒是否有支原体或细菌污染;其次,确定病毒感染MOI是否过高,梯度稀释后感染,寻找合适的MOI。同时考虑目的细胞可能比较敏感,更换其它细胞感染确定病毒是否有问题。病毒对某些敏感细胞有毒性可能是不可避免的。如果以上都排除后细胞状态仍然不好,尝试增加血清含量,观察细胞状态是否好转。
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问
abcam的抗体说明书上观察到的分子量是33,我跑的都在42,文献里别人用sigma或者其他抗体条带也在42,我跑的能不能用啊?呢
loveliufudan
抗体说明书中提到的分子量是供参考的,它是由厂家或供应商提供的建议值,可能会因为生产批次或其他因素而略有不同。因此,在实验中,您应该以您的实验结果为准,而不是仅依赖于说明书提供的参考值。在您的实验中,您得到的蛋白质大小为42 kDa,而在其他人的实验中,他们使用的抗体或其他试剂得到的蛋白质大小也为42 kDa。这表明您的实验结果与其他人的实验结果一致,并且与文献报道的结果相符合。因此,您可以使用您的
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问
Graphpad prism 比较两组数据(两个样本)之间的显著性差异怎么比,wb条带明显有差异,但为什么试了一下没有差异性
菊与刀刀
显著性差异要有样本平均值才能比,每组一个样本比不了
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问
WB实验转膜过程中出现以下这种问题?
土井挞克树
可能是存在移位或者重叠,建议不要一起转,分开转就不会这样了。
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问
WB条带中间空白,两边有信号,是什么原因呢
huarenqiang5
wb条带中间有空白的原因是过高的蛋白上样量或一抗和二抗浓度过高都会促使底物过快的消耗导致。
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问
请问这种泳道内部背景很黑是啥原因呢?跑了好几次都这样😭抗体是新配制的,用的是半干转20伏28分钟
sswei
背景黑可能有以下几个原因:1.没有封闭好,但这个可能很小2.一抗浓度太高,适当降低增加一抗稀释比例3.二抗孵育时间太长,一般室温45min,二抗切不可孵育时间太长
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问
热蛋白组学实验裂解细胞,可以用Rapigest SF吗?
土井挞克树
裂解剂一般还是要选择NP-40,Rapigest SF注意作用是表面活性剂,增强表面活性
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问
小鼠免疫相关问题求教
洛噜啦噜啦嘞
首先,细胞免疫效果取决于抗原。正常情况下皮下接种,背部皮下即可。接种成功,其实,我们看的是一段时间之后,接种位置处是否出现溃烂,即表明有炎症产生,当然,并不是所有的免疫接种都会出现这种情况。
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问
细胞孵育完IgG抗体会影响后续加药吗
sswei
可能存在抗体不识別或抗体选择错误等情况。
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问
胶乳增强免疫比浊试剂稳定性的相关问题
土井挞克树
先把沉淀去除,用上清液再观察七天。
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问
WB条带很丑,而且还是皱眉条带?
土井挞克树
蛋白的浓度太大,而且ph也需要调节
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问
请问WB检测培养基里面分泌蛋白的表达量,可以用什么内参?
土井挞克树
可以用actin做内参,比较稳定
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问
提细胞蛋白,裂解离心之后,离心管里的沉淀是什么?
loveliufudan
在细胞裂解和离心的过程中,离心管里的沉淀可能是细胞的细胞器、膜片段、细胞骨架等细胞内结构,以及细胞中的蛋白质、核酸等生物大分子。具体来说,如果你是提取全细胞蛋白,则沉淀中会含有细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器以及膜片段、细胞骨架等细胞内结构。同时,还会含有细胞中的蛋白质、核酸等生物大分子。如果你是提取特定的蛋白质,则沉淀中只会含有该蛋白质所在的细胞器、结构或特定的蛋白质。需要注意的
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