畅月十一
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蛋白质-蛋白质相互作用是指两个或两个以上的蛋白质分子通过非共价键形成 蛋白质复合体的过程。
蛋白质与蛋白质之间的相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,对调控细胞及其信号有重要意义。
蛋白质互作研究按照实验目的可分为两大类,一是验证两个蛋白是否存在相互作用,二是筛选某个兴趣蛋白的互作蛋白。
据此是可以通过共价键形成ABC蛋白。
土井挞克树
可以溶解肽分子之间的氢键把三者分开,在那之前需要先确定三部分各自的功能域
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1.有可能。您可以尝试利用蛋白质交联技术,如形成二聚体的交联剂,将A、B、C三个蛋白质交联在一起。接着可以使用亲和纯化、凝胶过滤层析或其他蛋白质纯化技术,如磷酸化蛋白质纯化,将交联的三个蛋白质一起纯化,从而得到这些蛋白质的全部互作体系。需要注意的是,交联条件需要经过优化,以避免交联产生的影响影响到蛋白质的性质。
2.对于比较每个组的每个体系中互作ABC蛋白的量,您可以使用共免疫沉淀(co-IP)技术。通过添加相应的抗体和琼脂糖珠子,可以富集含有ABC蛋白质的蛋白质复合物。您可以根据您需要比较的目的,调整IP抗体和琼脂糖珠子的量,来获取想要的蛋白质复合物。需要注意的是,共免疫沉淀法在特定的条件下可以检测到许多蛋白质相互作用,但也可能出现假阳性和假阴性的情况,所以需要在实验中控制实验条件并进行多次重复实验以提高数据的可靠性。
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