我怎么123
我看文献里提到的温和的变性剂用的都是NP-40,说是不太会改变膜蛋白的性质,但我们买的Rapigest SF,这个跟NP-40有什么区别呢?我没有查到
土井挞克树
裂解剂一般还是要选择NP-40,Rapigest SF注意作用是表面活性剂,增强表面活性
sswei
RapiGest SF(表面活性剂)可根本性地提高蛋白酶解的速度和回收率。RapiGest SF是一种温和的变性剂,有助于溶解和展开蛋白质,从而使其更易于被裂解,同时又不变性或抑制常规蛋白酶的活性。不同于SDS或尿素等常见变性剂,RapiGest SF并不会修饰多肽或抑制常规蛋白酶活性。适用于胰蛋白酶、Lys-C、Asp-N和Glu-C等酶蛋白。
RapiGest SF有以下优点:
综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。
作用过程中,不对蛋白造成副反应化学修饰。
操作简单、全面适应液质分析方法。
常规操作浓度对胰蛋白酶活性无抑制。
可大大缩短酶解反应时间。
对各种蛋白酶、肽-N糖苷酶等多种酶解过程都适用。
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品,也可以用于真菌或细菌样品。
NP-40裂解液的主要成分为Tris(pH7.4),NaCl,NP-40,焦磷酸钠,β-甘油磷酸,原钒酸钠,氟化钠,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
loveliufudan
Rapigest SF和NP-40是两种不同的试剂,用于细胞裂解时的变性剂。
Rapigest SF是一种离子对交换剂,主要用于裂解细胞、组织等样品中的蛋白质,并使其变性,以便后续的质谱分析。它的作用机制是与样品中的蛋白质结合,从而使蛋白质变性,并使其易于裂解。与NP-40相比,Rapigest SF的作用是更温和的,可以在酸性和中性条件下裂解蛋白质,而NP-40在碱性条件下更加有效。
NP-40则是一种非离子表面活性剂,主要用于裂解细胞膜和提取细胞质中的蛋白质。与Rapigest SF相比,NP-40的作用是更加彻底的,可以有效地裂解细胞膜,但同时也会对膜蛋白的性质产生一定的影响。因此,在热蛋白组学实验中,为了保持膜蛋白的完整性和结构,通常会选择更温和的变性剂,如Rapigest SF。
总之,Rapigest SF和NP-40的作用机制不同,具体使用哪一种变性剂,需要根据实验需要来选择。如果您的实验需要保持膜蛋白的完整性和结构,则可以考虑使用Rapigest SF。